KNK437抑制乙型肝炎病毒复制及转录

• 作者: 朱祥 程智逵 穆敬芳 胡康洪 黄亚运
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒(HBV) 热休克蛋白(Hsps) KNK437 抑制剂
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 肝炎研究专题论著
• 页码范围: 24-35
• 页数: 12页
• 分类号: R373.2
• 语种: 中文

摘要

乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)在肝细胞内复制过程中,病毒反转录酶(P蛋白)与前基因组RNA(Pregenomic RNA,pgRNA)上的RNA包装信号ε形成P-ε复合物,启动反转录合成和核衣壳装配.封闭P-ε相互作用是一种极具吸引力的抗HBV策略.已知P-ε形成RNP复合物正常发挥活性时,需要热休克蛋白(Heat-shock proteins,Hsps)参与.本研究探索Hsps抑制剂KNK437对HBV复制及转录的影响.主要运用了三种工作模型:HepG2.2.15细胞系、瞬时转染1.05×HBV(pCH9-3091)质粒的Huh7细胞系和瞬时转染1.3×HBV(pGEM-1.3×HBV)质粒的Huh7细胞系.采用CCK-8方法检测KNK437的细胞毒性,ELISA测定细胞培养液上清中HB-sAg和HBeAg的分泌水平;q-PCR和qRT-PCR分别检测细胞内HBV核衣壳中DNA和细胞内HBV RNA水平;Western blotting检测细胞内衣壳亚单位(core)表达水平;qRT-PCR检测细胞内Hsps本身的转录水平.结果表明:20 μM KNK437对细胞没有毒性,且在该浓度下KNK437除HepG2.2.15模型外,均下调HBV HBsAg和HBeAg的胞外分泌,抑制细胞内HBV核衣壳中DNA合成,降低细胞内HBV RNA转录水平,最低可使DNA水平降至1.5％左右,RNA水平降至30％左右,从而表明KNK437抑制HBV复制和转录.在HepG2.2.15中的Western blotting显示,KNK437明显减少细胞内衣壳亚单位(core)表达水平.KNK437也抑制Hsp70,Hsp90b,Hsp40等三种热休克蛋白RNA的转录,从而验证了它的确是一种泛Hsps抑制剂.本研究结果显示KNK437具有潜在抗HBV应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡康洪	中国科学院武汉病毒研究所	7	23	2.0	4.0
2	黄亚运	中国科学院武汉病毒研究所	1	0	0.0	0.0
3	穆敬芳	中国科学院武汉病毒研究所	1	0	0.0	0.0
4	程智逵	中国科学院武汉病毒研究所	1	0	0.0	0.0
5	朱祥	中国科学院武汉病毒研究所	1	0	0.0	0.0