一种改进的大鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养方法

• 作者: 丁娟 丁敬宾 关立锋 刘娟 杨慧莹 王志军 马小虎
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: 原代培养 星形胶质细胞 细胞纯化
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 349-353
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2017.03.017

摘要

目的:改进大鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养方法,从而获取高纯度星形胶质细胞用于神经科学研究.方法:新生大鼠(2～3日龄),75％酒精消毒后断头,于冰上取大脑皮质置于冰冷的D-Hanks液中,去除脑膜和血管,剪碎后用0.25％胰酶消化并分离细胞,以1×105/ml的密度接种于预铺0.015％多聚赖氨酸的细胞瓶中培养.细胞纯化采用“差速贴壁法”、“梯度血清法”和“十字手摇法”,以获取高纯度星形胶质细胞.通过星形胶质细胞特异性表达蛋白即胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)行免疫细胞荧光染色来鉴定细胞纯度.结果:星形胶质细胞纯度大于98％,可多次传代,细胞增殖快,且生长良好.结论:改进的原代星形胶质细胞培养方法,操作简单,细胞纯度高,能满足各种神经科学研究中对高纯度星形胶质细胞培养的实验要求,适宜推广.