冠蛋白-1不同表达水平对巨噬细胞iNOS、TLRs表达以及凋亡的影响

• 作者: 刘革力 周芳妮 周静瑶 张路渝 陈全
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: 巨噬细胞 冠蛋白-1 iNOS TLRs F-actin 凋亡 钙调磷酸酶
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 148-156
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2017.02.0271

摘要

冠蛋白-1 (Coronin-1)在真核细胞中广泛表达,涉及钙离子稳态、细胞骨架动力学、免疫及炎症反应等多种细胞功能.该研究探讨了冠蛋白-1不同表达水平对巨噬细胞诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)表达和凋亡的影响并探讨其分子机制.根据冠蛋白-1表达水平的差异,实验细胞分为RAW264.7-Cor.Plus、RAW264.7、RAW264.7-Cor.Minus 3组.各组细胞分别经4μmol/L钙调磷酸酶抑制剂环孢素A(cyclosporinA,CsA)处理24 h或2μmol/L肌动蛋白聚合抑制剂松胞菌素D(cytochalasin D,cytD)处理48 h,同时设未处理对照,再分别用Real-time PCR法检测iNOS mRNA水平,Western blot法检测细胞TLR2、TLR4、TLR9及钙调磷酸酶(calcineurin,CaN)的蛋白质水平,流式细胞术检测细胞凋亡百分率.各组细胞用四甲基异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(TRITC-phalloidin)染色后,计算纤维型肌动蛋白(F-actin)重排率.结果显示,冠蛋白-1过表达细胞相对于冠蛋白-1正常表达细胞,其iNOSmRNA水平以及TLR2、TLR4、TLR9蛋白表达水平和细胞凋亡率均显著降低(P＜0.05);CsA作用后,RAW264.7-Cor.Plus的iNOS mRNA水平以及TLR2、TLR4、TLR9蛋白质水平和细胞凋亡率均较未处理对照细胞显著增加(P＜0.05),RAW264.7和RAW264.7-Cor.Plus细胞的CaN水平较未处理对照细胞显著降低(P＜0.05);cyt作用后,与未处理对照细胞相比,iNOS mRNA水平及细胞凋亡率无显著性差异(P＞0.05),但TLRs的表达显著降低(P＜0.05);经鬼笔环肽染色后,RAW264.7-Cor.Plus细胞F-actin重排率显著高于RAW264.7细胞(P＜0.05).以上结果表明,冠蛋白-1过表达不仅促进了巨噬细胞F-actin重排,而且下调了iNOS、TLRs水平并且抑制细胞凋亡,其分子机制与冠蛋白-1促进钙调磷酸酶调控的Ca2+信号通路有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈全		58	230	9.0	11.0
2	周芳妮		3	5	1.0	2.0
3	刘革力		36	57	4.0	6.0
4	张路渝		9	16	2.0	4.0
5	周静瑶		2	1	1.0	1.0