利用放线菌酮提高黄素单氧化酶FMOGS-OX1亚细胞定位的准确性

• 作者: 夏洪宇 孔稳稳 徐蕊 李晶 苍炜
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: GFP FMOGS-OX1 亚细胞定位 放线菌酮 内质网
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 83-88
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.05.012

摘要

研究蛋白质亚细胞定位的常规方法是构建由35S启动子驱动目的基因与绿色荧光蛋白基因(GFP)融合的表达载体,在细胞中瞬时或稳定表达来确定该蛋白质在细胞中的定位.35S启动子的优势是能够获得较强的GFP信号,但同时也可能因为蛋白质合成量过大,导致部分蛋白滞留在运输途径中或出现在其真实定位以外的区域.为了解决这一问题,以模式植物拟南芥中黄素单氧化酶FMOGS-OX1为例,利用蛋白质抑制剂放线菌酮处理过量表达FMOGS-OX1-GFP融合蛋白的烟草叶片.结果表明:未经放线菌酮处理的烟草叶片表皮细胞,细胞质和内质网中均呈现了较强的荧光信号,放线菌酮处理后,内质网上的信号消失,而细胞质则呈现出稳定的信号,因此判断FMOGS-OX1合成后可能是经过内质网运输到细胞质中的.上述结果证明适当的放线菌酮处理,能够避免强启动子驱动报告基因造成的蛋白质合成过量的问题,可有效地提高蛋白质亚细胞定位的准确性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晶		132	1191	20.0	26.0
2	孔稳稳		6	57	3.0	6.0
3	夏洪宇		2	2	1.0	1.0
4	徐蕊		1	0	0.0	0.0
5	苍炜		1	0	0.0	0.0