旋毛虫成虫排泄分泌蛋白组分分析

• 作者: 吴琦 宋迪 常雪莲 张慧 徐岚松 方强 杨小迪 汪瑞 王小莉 程洋 薛仁敏 陈兴智 陶志勇
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 旋毛虫 成虫 排泄分泌蛋白 shotgun技术 炎症性肠炎
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 24-29
• 页数: 6页
• 分类号: R383.15
• 语种: 中文

摘要

目的 通过“鸟枪法” (shotgun技术)分析旋毛虫(Trichinella spiralis)成虫排泄分泌蛋白(adult worm excretory/secretory protein,AWESP)的组分,寻找其调节人炎症性肠炎的活性成分. 方法 制备旋毛虫AWESP,经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离酶解后,采用shotgun液相色谱-串联质谱系统鉴定,将分析所得的数据通过Masco软件进行数据库检索,完成蛋白的鉴定,并对鉴定出的蛋白从细胞组分、分子功能和生物学途径3个方面进行Gene Ontology (GO)分类. 结果 SDS-PAGE分离的旋毛虫AWESP相对分子质量(Mr)约15 000～116 000,质谱分析共获得280个蛋白,通过Masco软件检索已鉴定的蛋白为96种,假定的蛋白为98种,未鉴定的蛋白为86种.已初步发现至少有4种蛋白可能具有潜在的调节人炎症性肠炎的作用,包括半胱氨酸蛋白酶抑制剂、丝氨酸蛋白酶、53 000排泄/分泌抗原和谷胱氨肽转移酶.GO工具分析显示,已鉴定的蛋白具有104种分子功能,参与了363种生物过程. 结论 经Masco软件检索,旋毛虫AWESP成分复杂多样,已鉴定的蛋白有96种,从已明确的蛋白中初步筛选出4种与调节人炎症性肠炎潜在相关的蛋白.