摘要:
目的 探讨甲强龙(MP)在骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗大鼠脊髓损伤(SCI)中的作用及对局部肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-13表达变化的影响.方法 采用改良Mlen法制备40只T10脊髓损伤雄性大鼠模型,随机数字表法随机分为对照组、MP组、BMSCs组和MP+ BMSCs组4组,每组10只.按上述分组分别在脊髓损伤后立即尾静脉缓慢推注30 mg/kg MP和/或在脊髓损伤后2h于脊髓损伤部位注射全贴壁法培养并以BrdU标记的BMSCs.术后1、7、14d,采用BBB运动评分法评价大鼠后肢运动功能恢复.14 d后处死各组大鼠并取出脊髓样本,分别进行TNF-α、IL-1β免疫组织化学染色和Tunel染色,各组统计视野内TNF-α、IL-1p表达阳性细胞数并检测细胞凋亡率;采用BrdU单染观察BMSCs组和MP+ BMSCs组中BrdU阳性率.结果 术后1d,各组BBB评分差异无统计学意义(x2=1.0756,P=0.7829).术后7d,各组大鼠双后肢运动功能较前明显恢复,其中MP组(x2=8.3265,P=0.0325)和BMSCs组(x2=14.1166,P=0.0036)的BBB评分明显高于对照组;MP+ BMSCs组的BBB评分明显高于MP组(x2=17.7186,P=0.0002)和BMSCs组(x2=15.8110,P=0.0024).术后14 d,各组大鼠双后肢运动功能明显恢复,MP+BMSCs组BBB评分明显高于MP组(x2=24.7259,P<0.0001)和BMSCs组(x2=25.6014,P<0.0001),MP组(x2=13.5060,P=0.0062)和BMSCs组(x2=8.9613,P=0.0299)的BBB评分明显高于对照组.术后14 d,对照组、MP组、BMSCs组和MP+ BMSCs组的细胞凋亡率分别为(48.47±5.70)%、(31.95±3.58)%、(41.39±2.33)%和(23.48±2.69)%,其中,MP组(q=14.84,P<0.0001)和BMSCs组(q=6.716,P=0.0002)明显低于对照组,MP+ BMSCs组明显低于MP组(q=7.332,P=0.0001)和BMSCs组(q=15.460,P<0.0001).术后14 d,免疫组织化学染色结果显示,MP组(q=14.710,P<0.0001;q=6.710,P<0.0001)和BMSCs组(q=6.502,P=0.0001;q=2.849,P=0.0514)的TNF-α及IL-1β阳性细胞数均明显低于对照组,MP组(q=5.573,P=0.0004;q=4.596,P=0.0025)和BMSCs组(q=13.780,P<0.0001;q=8.456,P<0.0001)的TNF-α及IL-1β阳性细胞数明显高于MP+ BMSCs组.术后14 d,BrdU染色结果显示,BMSCs组的BrdU阳性率为(6.600±0.3399)%,明显低于MP+ BMSCs组的(9.300±0.5175)%(=4.361,P=0.0004).结论 MP可明显提高BMSCs移植治疗SCI的大鼠后肢运动功能恢复,二者可协同降低局部TNF-α和IL-1β表达水平,并且MP有效提升了移植BMSCs的存活.