检测侵染生姜的烟草花叶病毒ELISA的建立

• 作者: 邓辉 韦传宝
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草花叶病毒 生姜 ELISA方法
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1355-1358,1360
• 页数: 5页
• 分类号: Q785|S436.421
• 字数: 4199字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2017.09.016

摘要

目的:建立检测侵染生姜的烟草花叶病毒的ELISA方法.方法:用RT-PCR方法检测侵染生姜的烟草花叶病毒,挑选仅含烟草花叶病毒的生姜叶片,采用离心方法提取叶片中的烟草花叶病毒,通过12％ SDS-PAGE 和5％～20％梯度SDS-PAGE二次制备电泳分离出烟草花叶病毒的外壳蛋白CP,将含CP的聚丙烯酰胺凝胶磨细后免疫小鼠,获得抗血清.用Western blot检测抗血清特异性,ELISA检测抗血清的结合性,通过亲和层析纯化抗血清中的IgG.以待测生姜叶片液为抗原包被,纯化的抗血清IgG为一抗,羊抗小鼠 IgG为二抗,建立检测侵染生姜的烟草花叶病毒的间接ELISA.结果:抗血清中的IgG仅仅与烟草花叶病毒的CP结合,并能够结合天然烟草花叶病毒颗粒.建立的ELISA对花叶病生姜叶片的检测结果与RT-PCR检测结果一致.结论:成功地建立了检测侵染生姜的烟草花叶病毒的ELISA方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦传宝	皖西学院生物与制药工程学院	78	287	9.0	12.0
2	邓辉	皖西学院生物与制药工程学院	22	68	3.0	8.0