2种去除Vero细胞DNA工艺的研究

• 作者: 岳卓 李婉莉 王辉 董圆 赵玉秀 高波
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鱼精蛋白 非限制性内切酶 疫苗 Vero细胞DNA
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 308-310,320
• 页数: 4页
• 分类号: R979.9
• 语种: 中文

摘要

目的 建立并比较2种去除Sabin株脊髓灰质炎疫苗Vero细胞DNA工艺方法.方法 采用不同终浓度的鱼精蛋白和非限制性核酸内切酶在不同条件下分别处理Sabin株脊髓灰质炎病毒浓缩液,采用荧光染色法检测宿主细胞DNA、酶联免疫法检测D抗原和宿主残余蛋白含量.结果 鱼精蛋白的终浓度为1g/L～ 1.5 g/L,病毒浓缩液中Vero细胞DNA的去除率达98％以上,抗原回收率达85％以上,宿主细胞残余蛋白去除率可达30％左右;非限制性核酸内切酶的终浓度为100 U/ml～ 150 U/ml,37℃孵育2h转入2℃～8℃孵育18 h～20 h,病毒浓缩液中Vero细胞DNA的去除率达95％以上,抗原回收率达98％以上,宿主细胞残余蛋白基本无去除.结论 2种工艺均可用于去除Sabin株脊髓灰质炎疫苗中Vero细胞残余DNA,非限制性核酸内切酶法操作更简便快捷.