NLRP3炎症小体参与光气致急性肺损伤的炎症反应

• 作者: 何岱昆 卲义如 张峰 张琳 张静 申捷
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 关键词: NLRP3炎症小体 光气 急性肺损伤 炎症
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 491-496
• 页数: 6页
• 字数: 5505字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2017.07.004

摘要

目的 探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体介导的白细胞介素-1β(IL-1β)等炎性因子释放在大鼠光气致急性急性肺损伤(ALI)发病机制中的作用.方法 将20只大鼠随机分为2组,空气对照组(吸入与光气染毒组同等流量的空气)10只,光气染毒组(吸入8.33 mg/L纯度为100％的光气5min)10只.染毒6h后收集血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织.制作肺脏石蜡切片,HE染色观察形态学改变,免疫组化检测肺组织中NLRP3蛋白表达水平.蛋白质免疫印迹试验(Westere blot)技术和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)mRNA和蛋白的表达.采用双抗体夹心酶标免疫分析法(ELISA法)测定各组血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33水平;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对肺组织IL-1β、IL-18和IL-33 mRNA水平进行半定量研究.结果 成功复制光气吸入性肺损伤模型.染毒6h后HE染色形态学观察可见,光气染毒组肺组织中有大量炎性细胞浸润,免疫组化染色结果显示,光气染毒组大鼠肺泡间隔增厚,肺组织中可见较多NLRP3阳性细胞.与空气对照组(mRNA:NLRP3为21.49±1.44,Caspase-1为23.38±1.37;蛋白含量的相对值:NLRP3为0.090 6±0.0257,Caspase-1为0.094 2±0.0346)比较,光气染毒组肺组织中NLRP3和caspase-1 mRNA和蛋白表达量(mRNA:NLRP3为28.19±1.11,caspase-1为28.67±0.89;蛋白含量的相对值:NLRP3为0.655 6±0.171 4,caspase-1为0.964 1±0.284 6)明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);ASC mRNA和蛋白表达量无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05).与空气对照组(肺组织mRNA:IL-1β为15.25±0.72、IL-18为23.16±0.60、IL-33为22.48±1.25;血清IL-1β为109.6±1.9、IL-18为36.12±1.49、IL-33为11.30±1.27;BALF:IL-1β为170.4±3.0、IL-18为48.15±3.08、IL-33为21.00±1.43)比较,光气染毒组肺组织IL-1β、IL-18和IL-33 mRNA (IL-1β为22.68±1.16、IL-18为30.35±1.23、IL-33为31.44±1.21)表达量明显升高,血清和BALF中IL-1β、IL-18和IL-33蛋白含量(血清:IL-1β为418.7±13.9、IL-18为140.4±5.0、IL-33为25.70±1.16;BALF:IL-1β为615.8±24.9、IL-18为151.60±6.38、IL-33为38.30±1.248)明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 NLRP3炎症小体介导炎性反应可能参与了光气致急性肺损伤的发病过程,可能是急性肺损伤的发病机制之一.