Indoxyl Sulfate诱导腹膜间皮细胞转分化的实验研究

• 作者: 俞国庆 傅云泉 庄永泽 王强 陈鑫 黄雅清
• 来源期刊: 中华细胞与干细胞杂志（电子版）
• 关键词: 腹膜间皮细胞 硫酸吲哚酚 细胞上皮-间充皮转分化 转化生长因子β
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 152-158
• 页数: 7页
• 字数: 4798字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.2095-1221.2017.03.006

摘要

目的 硫酸吲哚酚(IS)刺激永生化人腹膜间皮细胞株(HMrSV5)后,研究细胞是否发生上皮细胞-间充质转分化(EMT),同时探索转化生长因子β1(TGF-β1)可能在其中的作用.方法 体外培养HMrSV5,传代后,随机将人腹膜间皮细胞株分成以3组:对照组:加入4.25％腹膜透析液与培养液共培养;IS处理组:分别用含250 μtmol/LIS、500 μmol/LIS、1 000 μtmol/LIS浓度的培养液与4.25％腹膜透析液共培养;TGF-β1受体抑制剂组:用含2μmol/L LY364947+IS的培养液与4.25％腹膜透析液共培养.分别在培养0、4、12、24、48和72 h时间下,采用细胞免疫荧光法观察细胞形态变化,Western Blot法研究细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达规律,48 h时用ELISA法测定纤维连接蛋白(FN),层粘连蛋白(LN5)两种基质蛋白的分泌情况.结果 (1)免疫荧光法显示:与正常细胞比较,IS处理组细胞由典型的铺路样鹅卵石状,逐渐变细变长,呈梭形改变;而TGF-β1受体抑制剂组细胞形态变化不明显,不如IS处理组;(2) Western Blot法检测结果显示:与对照组比较,IS处理组α-SMA的表达水平明显增加,48 h时1 000 μtmol/LIS表达最明显(39.929±2.610 vs 0.996±0.001;P＜0.01),差异有统计学意义;与IS处理组比较,TGF-β1受体抑制剂组的表达则明显减少,其中48 h时抑制明显(7.418±3.075 vs 39.929±2.610,P＜0.01),差异有统计学意义;(3) ELISA法结果显示:与对照组比较,IS处理组基质蛋白FN(1.368±0.040 vs 1.094±0.036,P＜ 0.01)、LN5(1.031±0.085vs 0.860±0.063,P＜0.01)的表达均上调,差异有统计学意义;与IS处理组比较,TGF-β1受体抑制剂组FN (0.925±0.15 vs 1.368±0.040,P＜ 0.01)、LN5 (0.795±0.426 vs 1.031±0.085,P＜ 0.01)分泌均减少,差异有统计学意义.结论 IS可诱导腹膜间皮细胞发生EMT,TGF-β1的参与可能起重要作用,这为治疗腹膜纤维化可能提供新的靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王强	中国人民解放军福州总医院肾内科	176	583	12.0	16.0
2	陈鑫	中国人民解放军福州总医院肾内科	34	98	6.0	8.0
3	庄永泽	中国人民解放军福州总医院肾内科	5	52	3.0	5.0
4	俞国庆	中国人民解放军福州总医院肾内科	1	1	1.0	1.0
5	黄雅清	中国人民解放军福州总医院肾内科	1	1	1.0	1.0
6	傅云泉	中国人民解放军福州总医院肾内科	1	1	1.0	1.0