低剂量无机砷对人正常肝细胞L-02中Sirt1及细胞周期相关基因表达的影响

• 作者: 严画竹 包莹 李俊骏 李冰洋 李悦 杨庆 江伟 褚衍茹 陈富讯
• 来源期刊: 中华地方病学杂志
• 关键词: 砷剂 表观遗传学 Sirt1 组蛋白类 乙酰化作用 细胞周期
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-20
• 页数: 5页
• 字数: 3336字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.2095-4255.2017.01.005

摘要

目的 探讨低剂量无机砷对人正常肝细胞(L-02)中Sirt1及细胞周期相关基因表达的影响.方法 0.0(对照)、0.1、0.2、0.4 μmol/L三氧化二砷(As2O3)处理L-02细胞24、48、72 h,CCK-8法检测砷剂对细胞增殖的影响;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测砷对Sirt1蛋白表达及细胞内分布的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测砷对Sirt1及细胞周期相关基因p16、p21和p53 mRNA表达的影响;染色质免疫共沉淀(ChIP)技术检测砷对细胞周期相关基因启动子区H3K9、H3K27乙酰化及Sirt1富集程度的影响.结果 ①不同剂量砷分别作用于L-02细胞24、48、72 h,均可促进细胞的增殖(P均＜0.05),增幅在15％～40％.②染砷48 h,0.1 μmol/L砷处理组p16、p21、p53 mRNA表达(0.80±0.10、0.88±0.02、0.85±0.05)低于对照组(1.00±0.04、1.00±0.03、1.00±0.06,t=-3.22、-5.76、-3.23,P均＜0.05);p16、p21、p53基因启动子区H3K9、H3K27乙酰化富集程度均低于对照组(t=-2.89、-9.50、-17.64、-2.88、-3.41、-3.73,P均＜0.05),降低幅度在20％～ 70％.③染砷48 h,0.1 μmol/L砷处理组Sift1在细胞核内分布(1.04±0.02)高于对照组(1.00±0.01,t=3.10,P＜ 0.05),平均增加4％;p16、p53基因启动子区Sirt1的富集程度(1.33±0.04、4.28±0.12)高于对照组(1.00±0.13、1.00±0.13,t=4.20、32.11,P均＜0.05),至少增加30％.结论 低剂量无机砷可能通过促进Sirt1的核内分布,降低p16、p21、p53细胞周期相关基因启动子区H3K9、H3K27乙酰化的富集水平,抑制p16、p21、p53细胞周期相关基因的表达,从而促进细胞的增殖.