LncRNA-ATB在高糖诱导的人腹膜间皮细胞表型转换及增殖中的作用

• 作者: 巨立中 张小金 王晓文 王汉民 车明文 魏达锋 龚翔
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞表型转换 LncRNA-ATB 人腹膜间皮细胞
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 985-991
• 页数: 7页
• 分类号: R459.51
• 字数: 3929字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2017.11.09

摘要

目的 探讨长链非编码RNA-ATB (LncRNA-ATB)在高糖刺激诱导的人腹膜间皮细胞(HPMCs)表型转换及增殖中的作用.方法 将HPMCs分为对照组、甘露醇组和高糖组3组.对照组不予任何处理;高糖组和甘露醇组分别采用50mmol/L D型葡萄糖和同等渗透压的甘露醇刺激72h.采用Real-time PCR检测各组LncRNA-ATB、E-钙黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子4(CDK4)、蛋白质p27(p27)及增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA的表达,Western blotting检测各组E-cadherin、α-SMA、CTGF、Cyclin D1、CDK4、p27及PCNA蛋白的表达,并采用流式细胞仪检测细胞周期.利用慢病毒转染技术,将Lenti-LncRNA-ATB和shRNA-LncRNA-ATB导入HPMCs中,分别上调及下调LncRNA-ATB的表达,采用Real-time PCR检测E-cadherin、α-SMA及CTGF mRNA的表达,Western blotting检测E-cadherin、α-SMA、CTGF蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期.结果 Real-time PCR、Western blotting及流式细胞仪检测结果显示,高糖刺激后,LncRNA-ATB、α-SMA、CTGF、CyclinD1、CDK4及PCNA表达增加,E-cadherin及p27表达减少(P＜0.05).上调LncRNA-ATB表达可促进细胞表型转换及增殖,下调LncRNA-ATB表达可抑制细胞表型转换及增殖.结论 高糖刺激可通过上调LncRNA-ATB的表达促进人腹膜间皮细胞表型转换及增殖.