淫羊藿苷通过激活Notch信号通路促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究

• 作者: 邓宇 陈廖斌
• 来源期刊: 中医学报
• 学科: 医学
• 关键词: 淫羊藿苷 骨髓间充质干细胞 成骨细胞分化 Notch信号通路 大鼠
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 2393-2398,2403
• 页数: 7页
• 分类号: R285.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.16368/j.issn.1674-8999.2017.12.624

摘要

目的:观察淫羊藿苷骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨细胞分化过程中的促进作用及其对Notch信号通路的影响.方法:通过对BMSCs细胞进行体外分离培养,将细胞分为对照组与给药组,给药组加入0.1mg·L-1、0.2 mg·L-1、0.4 mg·L-1、1 mg· L-1、2 mg·L-1、4 mg·L-1、10 mg·L-1、20 mg·L-1淫羊藿苷分别培养3d、7d、10 d、14 d、21 d,测定细胞上清液中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,确定最佳给药剂量.将细胞分为3组,对照组、骨分化诱导组、骨分化诱导+淫羊藿苷处理组(联合组),培育7～21 d后测定ALP阳性染色率,Western blot法检测不同处理后Notch信号通路中Norh1、CBF1、Jagged-1蛋白表达情况,RT-PCR法检测淫羊藿苷对Hes1、Runx2 mRNA的影响.结果:与对照组比较,0.1～1.0 mg·L-1淫羊藿苷处理后ALP活性升高较明显,7～14d内活性均逐渐升高,14 d时活性达到最大值,其中0.4mg·L-1处理活性最高.因此,选择淫羊藿苷最佳处理质量浓度为0.4 mg·L-1.对照组、联合组在细胞培养7～14 d间,ALP活性逐渐升高,14～ 21 d活性逐渐下降,第21天ALP活性维持较低水平;诱导组在培养期间ALP活性持续维持较高水平.第7天、第14天,与对照组比较,诱导组、联合组ALP活性升高,且诱导组升高程度高于联合组,差异有统计学意义(P＜0.05).第21天,联合组ALP活性高于对照组、诱导组,差异有统计学意义(P＜0.05).诱导组、联合组ALP阳性染色率均高于对照组,且联合组高于诱导组,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot结果显示,与对照组比较,联合组、诱导组Noth1、CBF1、Jagged-1蛋白表达量均升高,联合组蛋白表达量明显高于诱导组.RT-PCR结果显示诱导组Hesl、Runx2 mRNA表达量均高于对照组,联合组Hesl、Runx2 mRNA表达量高于诱导组.结论:淫羊藿苷能够促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,并通过上调Hesl、Runx2 mRNA表达以及增加Noth1、CBF1、Jagged-1蛋白表达来实现.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈廖斌		92	719	16.0	23.0
2	邓宇		23	118	6.0	10.0