瓜氨酸化α-烯醇化酶特异性单克隆抗体制备及其在阿尔茨海默病动物模型中的检测应用

• 作者: 刘德立 杨洋 熊丽 耿辉 胡梦蝶 苏伊玲 袁永泽 邓灵福 韩魏巍
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 抗原优势表位 瓜氨酸化 α-烯醇化酶 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 206-211
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

本研究利用杂交瘤技术制备瓜氨酸化α-烯醇化酶特异性单克隆抗体,并探究瓜氨酸化α-烯醇化酶抗体在检测阿尔茨海默病(AD)动物模型中的作用.利用生物信息学软件分析预测α-烯醇化酶的B细胞优势表位,选取9R-25F位氨基酸序列,将该表位多肽中2个精氨酸替换为瓜氨酸,化学合成瓜氨酸化α-烯醇化酶9R-25F多肽(citrullinated α-enolase peptide,CEP).采取活泼酯法将CEP多肽与BSA偶联制备CEP-BSA偶联抗原并免疫BALB/c小鼠,杂交瘤技术制备CEP单克隆抗体.免疫组织化学和Western blotting对其特异性进行验证.CEP-BSA偶联抗原免疫小鼠能诱发特异性抗体反应,经细胞融合、筛选得到一株稳定分泌CEP特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,命名为9B5.Western blotting分析显示该单克隆抗体能特异性结合瓜氨酸化α-烯醇化酶,免疫组织化学检测显示9B5单抗能结合AD模型大鼠脑组织细胞上瓜氨酸化的α-烯醇化酶.本研究成功制备的瓜氨酸化α-烯醇化酶特异性单克隆抗体将有助于进一步研究瓜氨酸化α-烯醇化酶在相关疾病发病中的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊丽		39	698	17.0	26.0
2	刘德立		74	1006	18.0	29.0
3	杨洋		31	48	4.0	6.0
4	邓灵福		26	205	8.0	13.0
5	袁永泽		7	15	3.0	3.0
6	韩魏巍		2	0	0.0	0.0
7	耿辉		6	5	1.0	2.0
8	苏伊玲		2	4	1.0	2.0
9	胡梦蝶		2	1	1.0	1.0