摘要:
目的:观察加入不同浓度的NaF后DMEM培养基的渗透压变化情况及其对成釉细胞形态的影响.方法:配置含NaF 0(对照组)、10.5、21、42、63、84 mg/L的DMEM培养液,并用冰点渗透压仪检测其渗透压值.取含NaF 0、42、84 mg/L的3组DMEM用于实验,同时设6组不含NaF的DMEM,并分别用58.5 mg/LNaCl、0.05 mg/L甘油、1mg/mL山梨醇将其中3组的渗透压调至与42 mg/L NaF组的渗透压值(323.3 mOsm/kg)接近;用117 mg/L NaCl、0.09 mg/L甘油、1.5 mg/mL山梨醇将其余3组的渗透压调至与84 mg/L NaF组的渗透压值(324.1 mOsm/kg)接近.最后取纯化后的成釉细胞,并将其随机分为9组,分别换用上述含不同浓度NaF、NaCl、甘油、山梨醇的DMEM培养基,并继续培养48 h后,用倒置显微镜和HE染色法观察各组成釉细胞形态变化.结果:42 mg/L NaF组的渗透压均低于对照组,而84 mg/L NaF组的渗透压值均高于对照组.倒置显微镜观察显示:对照组细胞主要呈铺路石样分布,且形态规整,仅有个别细胞脱壁悬浮;42 mg/L NaF组的细胞体积减小,部分细胞皱缩明显,少数细胞脱壁悬浮;84 mg/L NaF组的大部分细胞脱壁漂浮,仅残余个别贴壁细胞,且胞膜破裂,形态紊乱;不同浓度NaCl、甘油、山梨醇各组的细胞形态均与对照组相似,无明显差异.HE染色结果显示:对照组细胞成簇分布,形态不一,多呈圆形、椭圆形及不规则形,胞浆呈紫粉色,胞核为紫蓝色,胞浆内无空泡现象;42 mg/L NaF组的细胞胞浆内出现较多的空泡样变;84 mg/L NaF组仅可见少量细胞,且细胞皱缩成团,其余各组的细胞形态均与对照组无明显差别.结论:染氟成釉细胞的形态变化与氟离子浓度有关,培养基的渗透压升高对成釉细胞的形态无明显影响.