糖原合成激酶-3β/β-连环蛋白信号通路在贫铀致人肾近曲小管上皮细胞损伤中的作用

• 作者: 丁德芳 任湘祎 张旭霞 暴一众 李强 陈红红 高赟
• 来源期刊: 中华放射医学与防护杂志
• 关键词: 贫铀 糖原合成激酶-3β β-连环蛋白 肾损伤分子-1 HK-2细胞
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 放射生物学
• 页码范围: 171-176
• 页数: 6页
• 字数: 5075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2017.03.002

摘要

目的 探索糖原合成激酶-3β(GSK-3β)/β-连环蛋白信号通路对贫铀(depleted uranium,DU)致人肾近曲小管上皮HK-2细胞损伤的作用.方法 不同浓度DU染毒HK-2细胞3 ～24 h,采用免疫荧光法检测肾损伤分子-1(KIM-1)和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)表达水平以观察DU诱导HK-2细胞的损伤,免疫荧光法检测β-连环蛋白核转位,Western blot法检测p-GSK-3β(S9)、GSK-3β、β-连环蛋白及c-myc蛋白表达变化,观察GSK-3β/β-连环蛋白信号通路的时相变化;采用GSK-3β(KD)质粒瞬时转染和GSK-3β特异性抑制剂TDZD-8处理抑制HK-2细胞的GSK-3β活性,采用β-连环蛋白质粒瞬时转染HK-2细胞使其过表达,观察GSK-3β活性和β-连环蛋白表达变化对DU染毒致HK-2细胞损伤的影响.结果 300和600μmol/L DU染毒致HK-2细胞KIM-1和NGAL阳性细胞率随染毒时间的延长和染毒剂量的增加而增加,染毒后6、9和24 h明显高于空白对照组(KIM-1阳性细胞率:t=11.06、18.97、30.49,P＜0.05;t=6.79、16.02、85.45,P＜0.05;NGAL阳性细胞率:t=11.78、11.37、34.29,P＜0.05;=7.34、21.63、36.84,P＜0.05);p-GSK-3β(S9)/GSK-3β比值和核β-连环蛋白阳性细胞率于染毒后3、6、9和24 h明显高于空白对照组[p-GSK-3β(S9)/GSK-3β比值:t=3.95、4.69、5.40、3.34,P＜0.05];核β-连环蛋白阳性细胞率:t=4.61、6.52、36.64、14.93,P＜0.05),于染毒后9h达峰值,还激活了β-连环蛋白下游靶基因c-myc的蛋白表达.瞬时转染GSK-3β(KD)质粒明显抑制了HK-2细胞的GSK-3β活性(t=8.07,P＜0.05),降低了DU致染毒HK-2细胞的KIM-1阳性细胞率(t=24.77,P＜0.05).TDZD-8抑制GSK-3β活性的同时提高了β-连环蛋白核转位,亦能显著降低DU染毒诱导HK-2细胞的KIM-1阳性细胞率(=6.25、6.73,P＜0.05).而且,β-连环蛋白过表达显著减轻了DU诱导的HK-2细胞损伤(t=7.48,P＜0.05).结论 GSK-3β/β-连环蛋白信号通路是调控DU致HK-2细胞毒性的关键通路,抑制GSK-3β活性及β-连环蛋白表达能有效拮抗DU诱导的HK-2细胞损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	暴一众	复旦大学放射医学研究所放射生物部	7	9	2.0	2.0
2	陈红红	复旦大学放射医学研究所放射生物部	31	97	6.0	8.0
3	李强	复旦大学放射医学研究所放射生物部	76	362	9.0	15.0
4	张旭霞	复旦大学放射医学研究所放射生物部	8	5	2.0	2.0
5	高赟	复旦大学放射医学研究所放射生物部	2	0	0.0	0.0
6	丁德芳	复旦大学放射医学研究所放射生物部	2	0	0.0	0.0
7	任湘祎	复旦大学放射医学研究所放射生物部	1	0	0.0	0.0