低危型HPV-11 E6在小鼠骨髓源树突细胞中的定位表达及其诱发凋亡的研究

• 作者: 司晨琛 吉兴照 唐璐 孙丽娜 李振军
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 低危型HPV-11E6 GFP 树突细胞 凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 30-33
• 页数: 4页
• 分类号: R737.33
• 字数: 3121字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2017.01.007

摘要

目的：采用绿色荧光蛋白表达系统追踪低危型HPV-11E6蛋白在树突细胞( dentritic cell,DC)内的表达,探讨低危型HPV-11E6在树突细胞中的定位,观察低危型HPV-11E6蛋白诱导的树突细胞凋亡。方法构建真核表达载体pGFP-11E6,转染小鼠骨髓源树突细胞,荧光显微镜动态观察E6蛋白的定位和表达水平。采用流式细胞术检测转染后24 h低危型HPV-11E6蛋白的凋亡。结果树突细胞在分别转染pGFP-11E6和pEGFP-C1质粒后,GFP-11E6主要定位于细胞质内；而对照组的只表达GFP的蛋白则均匀分布于树突细胞。蛋白表达水平的检测表明,在转染树突细胞12 h,GFP-11E6和GFP蛋白开始表达(荧光强度分别为73.22,84.34),转染24 h蛋白表达均到达高峰(荧光强度分别为98.25,126.77),转染48 h蛋白表达荧光强度分别为87.46和103.56,转染72 h蛋白表达荧光强度分别为72.11和97.45。 Annexin-Ⅴ/PI流式细胞仪检测可见, GFP-11E6转染的细胞发生了凋亡。结论低危型HPV-11E6主要定位于树突细胞质内,并且可以诱导树突细胞凋亡。