Stra8过表达精原细胞的细胞周期同步化方法的建立

• 作者: 夏蒙蒙 夏静 牛长敏 王建军 申雪沂 郑英 郭佳倩 马海涛
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞周期 同步化 Stra8 精原细胞
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3-7
• 页数: 5页
• 分类号: R321.1
• 字数: 2882字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2017.06.001

摘要

目的 建立Stra8过表达精原细胞(Stra8-GC1)的细胞周期同步化方法,并应用流式细胞仪进行检测.方法 G1期同步化:应用血清剥夺方式分别培养Stra8-GC124h、36h、48h、60h、72h、84h和96h,收集细胞并应用流式细胞仪检测G1期细胞百分比;S期同步化:应用含有胸苷培养液培养Stra8-GC114～16h,更换正常培养基培养9h,再次加入胸苷培养14～16h,最后更换正常培养基分别培养0、3h,6h和9h,收集细胞并应用流式细胞仪检测S期细胞百分比;M期同步化:应用含有诺考达唑培养液分别培养Stra8-GC14h,8h和12h,收集细胞并应用流式细胞仪检测M期细胞百分比.结果 血清剥夺处理72h,Stra8-GC1 G1期细胞百分比为60％～70％,显著高于对照组的31.73％(P<0.05);二次胸苷阻滞法处理以及第二次释放3h,Stra8-GC1 S期细胞百分比为60％～70％,显著高于对照组的38.50％(P<0.05);诺考达唑处理8h,Stra8-GC1 M期细胞百分比为90％以上,显著高于对照组的13.85％(P<0.05).结论 成功构建Stra8过表达细胞的细胞周期同步化方法,为后续Stra8的功能研究奠定了基础.