三种不同乳鼠原代心肌细胞消化分离方法的对比研究

• 作者: 刘晓静 卫世强 朱庆磊 段玉慧 段鹏 王金鑫
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 乳鼠 胰蛋白酶 Ⅱ型胶原酶 激光共聚焦显微镜 线粒体膜电位
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 286-289
• 页数: 4页
• 语种: 中文

摘要

目的 对比研究三种乳鼠原代心肌细胞消化分离方法,比较不同方法分离获取的心肌细胞在数量、纯度、活力上的差异,为相关实验研究提供选择.方法 按照不同的消化方法进行分组,A组为0.08％胰蛋白酶单纯消化组;B组为0.08％胰蛋白酶+0.08％Ⅱ型胶原酶混合消化组;C组为0.08％胰蛋白酶和0.08％Ⅱ型胶原酶分离消化组.记录差速贴壁后的细胞数和活细胞率,对贴壁24 h后的心肌细胞进行免疫荧光染色,计算心肌细胞纯度,通过激光共聚焦显微镜对JC-1染色的心肌细胞进行线粒体膜电位检测,比较红绿荧光密度的差异,通过能量代谢间接反映细胞活力.结果 三种方法分离获得的心肌细胞数差异无统计学意义(P＞0.05),而活细胞率C组高于A组(P＜0.01);三组分离获得的心肌细胞纯度差异无统计学意义(P＞0.05);线粒体膜电位,A组荧光比值为0.928±0.078,B组荧光比值为0.943±0.099,C组荧光比值为1.160±0.089,三组之间差异有统计学意义(P＜0.01),C组线粒体膜电位高于A组和B组(P＜0.01).结论 三种消化方法在细胞数和细胞纯度上无明显差异,0.08％胰蛋白酶和0.08％Ⅱ型胶原酶分离消化的心肌细胞在活细胞率和细胞活力方面更优,可以作为常规的乳鼠心肌细胞分离方法的选择.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱庆磊	解放军总医院心内科	34	197	8.0	13.0
2	卫世强	解放军371中心医院心内科	11	62	5.0	7.0
3	王金鑫	解放军总医院心内科	4	7	2.0	2.0
4	段鹏	解放军总医院心内科	4	2	1.0	1.0
5	刘晓静	解放军总医院心内科	3	2	1.0	1.0
6	段玉慧	解放军371中心医院心内科	2	2	1.0	1.0