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摘要:
目的 探讨铁离子对成骨细胞株(hFOB1.19)生物活性,包括碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase activity,APA)、细胞凋亡、钙结节、Ⅰ型胶原(type 1 collagen,COL 1)和骨钙素(osteocalcin,OC)的影响.方法 成骨细胞(hFOB1.19)于5% CO2 34 ℃培养箱内培养,将不同浓度枸橼酸铁铵(ferric ammonium citrate,FAC)50、100、200 μmol/L和去铁胺(deferoxamine,DFO)5、10、20 μmol/L分别加入细胞培养基中,MTT法检测成骨细胞增生活性;碱性磷酸酶活性试剂盒检测碱性磷酸酶活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Von kossa染色法行钙结节染色;RT-PCR和Western blotting法分别检测 COL1和骨钙素(bone gla protein,BGP)的基因及蛋白表达.结果 (1)48 h后增生活性:FAC组细胞增生活性随FAC干预浓度的增加呈剂量依赖性降低(P<0.05),DFO组在5 μmol/L浓度组时促进成骨细胞增生,在10、20 μmol/L浓度组时抑制成骨细胞增生.(2)10 d时碱性磷酸酶活性:FAC组碱性磷酸酶活性随FAC干预浓度的增加而降低,DFO组碱性磷酸酶活性随DFO干预浓度的增加而升高(P<0.05);(3)48 h时凋亡:FAC组细胞凋亡率呈剂量依赖性升高(P<0.05),DFO组在5、10 μmol/L浓度时抑制细胞凋亡(P<0.05),在20 μmol/L则促进成骨细胞凋亡(P<0.05);(4)21 d时钙结节染色:FAC组随铁离子干预浓度增加,成骨细胞矿化面积、钙结节形成数量均减少,DFO组在5、10 μmol/L浓度时促进成骨细胞矿化功能,而20 μmol/L浓度时对成骨细胞矿化有抑制效应;(5)3 d时基因及蛋白表达:FAC组COL1、BGP基因和蛋白的表达呈剂量依赖性下调(P<0.05);DFO组COLⅠ、BGP基因的表达呈剂量依赖性上调(P<0.05),DFO在5、10 μmol/L浓度时促进COL1、BGP蛋白表达,在20 μmol/L浓度时抑制COL1、BGP蛋白表达.结论 不同浓度枸橼酸铁铵均抑制成骨细胞功能活性,提示高铁环境不利于成骨细胞的成骨功能.低铁环境对成骨细胞有双重效应,低剂量去铁胺对成骨细胞活性有促进作用,而高剂量去铁胺则对成骨细胞活性有抑制效应.
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文献信息
篇名 铁离子对人成骨细胞(hFOB1.19)生物活性影响
来源期刊 中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志 学科 医学
关键词 枸橼酸铁铵 去铁胺 hFOB1.19 钙结节 凋亡
年,卷(期) 2017,(2) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 130-139
页数 10页 分类号 R681
字数 5699字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-2591.2017.02.007
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 赵国阳 江苏大学附属医院骨科 20 68 4.0 7.0
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枸橼酸铁铵
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中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志
双月刊
1674-2591
11-5685/R
大16开
北京东城帅府园1号(北京协和医院内)
80-743
2008
chi
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