日本血吸虫mir-125b靶向调控宿主CD276的鉴定研究

• 作者: 刘军涛 夏天奇 朱丽慧 李建军 王立辉 程国锋 陈永军
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 日本血吸虫 mir-125b CD276 功能
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 寄生虫
• 页码范围: 34-39
• 页数: 6页
• 分类号: S852.735
• 字数: 3260字
• 语种: 中文

摘要

通过荧光素酶实验验证宿主CD276为日本血吸虫mir-125b的靶基因,并分析感染血吸虫后宿主CD27基因在不同组织中的表达情况.利用PCR扩增mir-125b与CD2 76互作的核酸序列,并将目的片段克隆至表达荧光素酶报告基因质粒的下游.将重组质粒转染到HEK293T细胞内,检测荧光素酶报告基因表达.进一步利用荧光定量PCR技术检测小鼠巨噬细胞在转染血吸虫mir-125b mimic后,靶基因CD276的表达情况,同时检测感染血吸虫不同时间段、小鼠不同组织中CD276的表达情况.荧光素酶实验表明转染mir-125b mimic和重组质粒后细胞的荧光素酶报告基因的表达极显著降低(P＜0.01),提示mir-125b可与CD276相关区域互作,抑制报告基因的表达;血吸虫mir-125b mimic转染小鼠巨噬细胞后导致其宿主CD276基因的表达降低,进一步提示宿主CD276可能为血吸虫mir-125b靶基因;荧光定量PCR分析表明感染日本血吸虫后的不同感染时期,小鼠淋巴细胞、肝脏及脾脏中的CD276的表达水平显著低于对照组(P＜0.01),进一步表明虫源性mir-125b在体内影响宿主CD276基因的表达.日本血吸虫mir-125b可能靶向调控宿主CD276基因的表达,在虫体与宿主互作中发挥重要调控功能.