三氯卡班诱导小鼠乳腺上皮细胞癌变的研究

• 作者: 刘家国 施金彤 明珂 杜红旭 武毅 王德云 胡元亮 陈云 韩开顺
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 三氯卡班 乳腺上皮细胞 致癌 活性氧簇 DNA损伤
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 888-893
• 页数: 6页
• 分类号: S859.79+9.1
• 字数: 4898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7685/jnau.201704040

摘要

[目的]广谱抗菌剂三氯卡班(TCC)在各种环境介质和生物体中被频繁检出.为了研究TCC对动物的危害,观察了TCC对正常小鼠乳腺上皮细胞(EpH4-Ev)的急慢性损伤作用,评价其对乳腺上皮细胞的诱癌作用,为防止TCC在动物用品中的滥用提供理论依据.[方法]采用MTT法确定TCC的最佳工作浓度后,作用于EpH4-Ev细胞,以48 h为1个药物作用循环,分别作用3和6个循环(命名为T3和T6细胞)后,使用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)水平,Western blot法测定细胞内磷酸化组蛋白(p-H2AX)的蛋白表达量,软琼脂克隆试验检测细胞非停泊性生长能力,细胞划痕试验测定细胞迁移能力,用此指标作为检测TCC引起细胞癌变的指标.[结果]EpH4-Ev细胞在0.195 μmol·L“TCC作用下,细胞活性最大,故0.195 μmol· L-1为TCC的工作浓度;T3和T6细胞的细胞增殖水平、ROS水平、p-H2AX蛋白表达量及软琼脂上的细胞集落个数均显著高于细胞对照;T6细胞的细胞划痕之间的距离显著小于细胞对照.[结论]TCC能够诱导正常的EpH4-Ev细胞发生癌变.