miR-130b通过调控PTEN在人视网膜母细胞瘤发挥促癌作用

• 作者: 刘朝 唐耀冰 杨延芳
• 来源期刊: 眼科
• 关键词: 视网膜母细胞瘤 miR-130b 上调 PTEN 促癌作用
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 276-281
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13281/j.cnki.issn.1004-4469.2017.04.014

摘要

目的 探讨miR-130b在人视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中的作用,并阐明其分子机制c设计实验研究.研究对象人RB癌组织及细胞系.方法 采用荧光定量PCR检测40例RB患者癌组织及相应癌旁组织中miR-130b的表达情况.采用噻唑蓝比色法(MTT)和蛋白印迹法检测miR-130b对RB细胞增殖及凋亡能力的影响.通过生物信息学分析预测miR-130b的靶基因,并利用双荧光素酶报告基因实验和蛋白印迹验证.主要指标细胞生存率、细胞凋亡率及荧光素酶活性.结果 miR-130b在人RB癌组织的表达量明显高于配对的癌旁组织(P=0.023);miR-130b在HXO-Rb44(P=0.008)和Y79(P=0.012)细胞系中的表达量亦高于正常视网膜血管内皮细胞(ACBRI-181).体外功能实验发现,转染miR-130b抑制物可显著抑制HXO-Rb44(P=0.004)和Y79(P=0.001)细胞的增殖,并增加HXO-Rb44(P=0.011)和Y79(P=0.027)细胞凋亡.生物信息学分析发现“与张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶”(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome 10,PTEN)是miR-130b的靶基因.双荧光素酶报告基因试验和蛋白印迹结果显示,miR-130b可直接与PTEN mNRA 3’-非编码区结合,并抑制其翻译,并最终降低HXO-Rb44(P=0.038)和Y79(P=0.025)细胞中PTEN蛋白表达水平.结论 miR-130b在RB组织表达上调,miR-130b通过下调PTEN的表达可促进RB细胞的增殖并减少其凋亡,提示miR-130b可作为RB基因治疗的一个新的分子靶点.