H3N2亚型犬流感病毒反向遗传操作系统的建立

• 作者: 刘芹防 李泽君 李雪松 杨健美 段旭彤 滕巧泱 田巧珍 申伟霞 荣广玉 赵凯 陈鸿军
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 犬流感病毒 H3N2亚型 反向遗传操作系统
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 页码范围: 7-11
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4011字
• 语种: 中文

摘要

H3N2亚型犬流感病毒(Canine influenza virus,CIV)可以在犬中迅速的传播,甚至引起犬的死亡,也可感染其他哺乳动物.目前该病毒致病的分子机制尚不清楚.为此,本研究采用RT-PCR技术扩增犬流感病毒A/Canine/Zhejiang/01/2010(H3N2)(简称ZJ2010)的PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS 8个基因片段,并分别克隆至双向表达载体pBD上.采用8质粒系统共转染293T细胞,转染48 h后加入TPCK胰酶作用2 h,将上清和细胞一同接种9~11日龄SPF鸡胚,并检测血凝效价.结果显示,本研究成功拯救获得了病毒株rZJ2010.rZJ2010株的8个基因片段的序列均与亲本ZJ2010株的序列相同.rZJ2010株与ZJ2010株在鼠的肺和鼻中复制水平接近.这些结果证实,本研究已成功建立H3N2亚型犬流感病毒反向株遗传操作系统,为该病毒的致病机理、传播机制以及跨宿主传播机制研究等奠定了技术平台.