H9N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR诊断技术的建立与应用

• 作者: 卢春晓 尹燕博 张乐萃 陈欣
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: H9N2亚型禽流感 HA基因 NA基因 M基因 多重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 16-19
• 页数: 4页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文

摘要

为建立H9N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR诊断技术,参考GenBank登录的H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的HA、NA、M基因序列,利用Primer Premier5.0软件设计3对可扩增HA、NA、M基因的特异性引物以及反转录引物.3对引物扩增的cDNA片段大小分别为1 742、1 410、1 027 bp.结果:通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了H9N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR诊断技术,与目的片段大小相符的片段,经测序均正确,且与其他常见禽病病原不存在交叉反应.该方法对HA基因的最低检出量为10-2 μg/μL cDNA,对NA基因的最低检出量为10-2μg/μL cDNA,对M基因的最低检出量为10-3 μg/μL cDNA.通过对30份H9N2阳性病毒液进行三重PCR,均可同时扩出HA、NA、M基因.结果表明,本试验建立了H9N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR诊断技术,为提高H9N2亚型禽流感病毒HA、NA、M基因序列分析的效率奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹燕博	青岛农业大学动物科技学院	69	359	11.0	15.0
2	张乐萃	青岛农业大学动物科技学院	22	43	4.0	6.0
3	陈欣	青岛农业大学动物科技学院	3	13	2.0	3.0