鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒和禽肺炎病毒三重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 刘加波 奉彬 张艳芳 王盛 罗思思 范晴 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲 黄莉
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 鸡新城疫病毒 H9亚型禽流感病毒 禽肺炎病毒 三重RT-PCR 检测
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 6-9,13
• 页数: 5页
• 分类号: S854.43
• 语种: 中文

摘要

本研究建立三重RT-PCR快速检测鉴别鸡新城疫病毒(NDV)、H9亚型禽流感病毒(AIV)和禽肺炎病毒(APV)的方法.根据GenBank中H9亚型AIV HA基因和鸡NDV以及APV F基因的保守序列分别设计合成了三对特异性扩增引物,通过优化反应条件建立了三重RT-PCR检测鉴别鸡NDV、H9亚型AIV和APV的方法.对该方法进行特异性、敏感性和临床样品检测.特异性试验结果显示,所有参试的NDV、H9亚型AIV、APV分别扩增出大小为247 bp、569 bp和424 bp的片段,而对照的其他毒株不扩增;敏感性试验结果表明,本试验建立的方法能检测到10 pg的各自RNA模板.检测临床样品132份,NDV阳性26份,H9亚型AIV阳性6份,APV阳性2份,结果与病毒分离结果一致.PCR阳性产物测序结果与各自毒株序列100％同源.表明本试验建立的三重RT-PCR检测鉴别鸡NDV、H9亚型AIV和APV方法具有特异、敏感、快速的特点,可用于临床快速、准确的鉴别检测.