流感病毒H1/H3亚型通用双重短探针实时RT-PCR检测技术与标准质控品研究

• 作者: 乔彩霞 张伟 张利峰 张鹤晓 蒲静 谷强 高志强
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 动物流感病毒 H1/H3亚型 通用双重 短探针 实时RT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-6
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-6005.2012.09.001

摘要

采用TaqMan方法,在对人、禽、猪以及马流感病毒代表株HA序列多重比对基础上,设计合成动物流感病毒H1亚型和H3亚型的兼并引物和LNA和MGB修饰短探针,经反应条件优化,建立了针对流感病毒H1亚型及H3亚型的双重实时RT-PCR检测方法.应用建立的方法分别对人、禽、猪以及马流感病毒核酸进行检测,结果显示,建立的方法通用性良好,可有效检测和鉴别H1和H3亚型流感病毒,但对其他亚型的流感病毒以及新城疫病毒核酸检测结果为阴性,表明建立的方法特异性强.进一步经体外转录制备了猪流感病毒H1和H3亚型HA完成编码区的核酸标准品cRNA,经稀释、分装、定量、均匀性和稳定性检验后,作为方法的质控品对建立的方法进行评价,结果表明,所建立的双重短探针实时RT-PCR方法灵敏度可达2.0×102拷贝/反应.在对586份临床样品的检测中,进一步证实了该方法快速、灵敏且重复性好,可满足动物流感病毒H1/H3亚型的早期快速检测的需求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒲静		34	111	6.0	8.0
2	张伟		48	119	7.0	8.0
3	高志强		48	143	7.0	9.0
4	张鹤晓		43	280	9.0	15.0
5	乔彩霞		27	128	7.0	9.0
6	谷强		31	138	6.0	11.0
7	张利峰		51	257	9.0	14.0