摘要:
哺乳动物各种生理功能中,生殖功能最易受热应激损伤.热应激使组织产生氧化应激,破坏雄性动物精子生成,从而影响繁殖效率.为探究黄芩苷对热应激小鼠(Mus musculus)睾丸损伤的影响,探讨黄芩苷的抗氧化作用机制,本研究将小鼠分成4组,常温对照组(C组)、黄芩苷组(C+B组)、热应激组(H组)和热应激加黄芩苷组(H+B组).C组和H组小鼠腹腔注射生理盐水,C+B组和H+B组小鼠腹腔注射黄芩苷(50 mg/kg),连续注射7d,H组与H+B组于第8天热应激(41℃)2 h,热应激结束后立即用断颈法处死所有处理组和对照组小鼠,取睾丸及附睾检测脏器系数和制备睾丸组织切片,睾丸组织用于检测氧化损伤指标丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和过氧化氢酶(catalase,CAT)的活力.末端脱氧核苷酸转移酶检测法(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)法检测睾丸组织细胞的凋亡.Westem blot检测睾丸组织内Fas/FasL蛋白的表达.结果显示,热应激能够显著降低睾丸和附睾脏器系数(P<0.05)并使睾丸组织结构发生病理性损伤,而黄芩苷可以显著缓解热应激引起的睾丸脏器系数降低(P<0.05)和组织损伤.与热应激组相比,热应激加黄芩苷组小鼠睾丸组织中MDA含量显著降低,SOD、CAT和GSH-Px活力则显著增加(P<0.05).黄芩苷组与热应激加黄芩苷组相比则无显著性差异.热应组小鼠睾丸组织细胞凋亡率与对照组相比显著增加(P<0.05),而热应激黄芩苷组与热应激组相比,小鼠睾丸细胞凋亡率则显著降低(P<0.05).此外,与对照组相比,热应激可以显著增加小鼠睾丸组织Fas (P<0.05)和/FasL(P<0.01)蛋白表达,而黄芩苷能显著降低热应激引起的小鼠睾丸组织中Fas/FasL蛋白表达(P<0.05).本研究结果表明,黄芩苷能减少受热应激时小鼠睾丸组织因氧化损伤造成的凋亡,其机制可能与增加抗氧化酶活性以及抑制Fas/FasL蛋白表达来抑制细胞凋亡有关,这为寻找缓解动物热应激方法提供理论依据.