广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的分离培养体系优化

• 作者: 张大鹏 李跃民 杨波 栗楠 肖雄 邱小燕
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 广西巴马小型猪 皮肤成纤维细胞 酶消化法 组织块培养法
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 99-103
• 页数: 5页
• 分类号: Q813.1|S828
• 字数: 4924字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2017.02.099

摘要

通过比较6种方法和5个部位分离成纤维细胞的效率,旨在优化广西巴马小型猪皮肤成纤维细胞的分离培养体系.结果表明:1)采用酶消化法Ⅰ所得成纤维细胞的密度显著高于其他处理组(P<0.05),其死亡率与方法Ⅳ处理组之间差异不显著(P>0.05),但显著低于其余处理组(P<0.05);2)冷冻保存10 d后复苏的耳部皮肤组织,经方法Ⅰ酶消化后所得成纤维细胞的密度和存活率均分别极显著低于新鲜组织方法Ⅰ处理组(P<0.01);3)组织块培养4 d后即可从其边缘长出成纤维细胞,再经过8 d培养,细胞汇合率可达100%;4)耳部皮肤组织所获成纤维细胞的密度显著高于其他部位处理组(P<0.05),而且贴壁生长效果良好;5)所得耳部皮肤成纤维细胞可传至10代以上,其中第3代和第4代生长最为迅速;6)生长曲线显示第3代耳部皮肤成纤维细胞呈典型的"S形"生长.因此,宜选用先加0.25%胰蛋白酶+0.04% EDTA消化30 min,再用0.2%胶原蛋白酶消化30 min的方法分离广西巴马小型猪的耳部皮肤成纤维细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李跃民	西南大学动物科技学院	69	182	8.0	10.0
2	肖雄	西南大学动物科技学院	26	47	4.0	6.0
3	杨波	西南大学动物科技学院	21	54	4.0	6.0
4	邱小燕	西南大学动物科技学院	17	16	3.0	3.0
5	栗楠	西南大学动物科技学院	2	3	1.0	1.0
6	张大鹏	西南大学动物科技学院	1	3	1.0	1.0