缺氧和营养缺乏对软骨终板干细胞凋亡的影响及相关机制

• 作者: 刘杰 浦路桥 王建 袁超 贾敏
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨终板干细胞 缺氧和营养缺乏 凋亡 B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)腺病毒E1B 19-kDa结合蛋白 Bcl-2关联x蛋白 Bcl-2关联k蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 449-455
• 页数: 7页
• 分类号: R393|R681.5
• 字数: 5025字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2017.05.11

摘要

目的:观察缺氧和营养缺乏对软骨终板干细胞(cartilage endplate-derived stem ceils,CESCs)凋亡的影响,探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2/腺病毒E1B 19-kDa结合蛋白3(Bcl-2/adenovirus E1B 19-kDa-interactingprotein 3,BNIP3)信号通路在其中的作用.方法:从临床获取退变椎间盘软骨终板标本,分离培养软骨终板细胞,使用琼脂糖筛选获得CESCs并进行干细胞标志物鉴定,将第三代细胞分别在常氧/完全培养基(对照组)与缺氧和营养缺乏(实验组)条件下培养48h,通过流式细胞术检测细胞凋亡率,CCK-8法检测细胞活性,WesternBlot检测BNIP3、Bcl-2关联x蛋白(Bax)、Bcl-2关联k蛋白(Bak)和低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达水平.使用BNIP3小干扰RNA(siRNA)干扰CESCs中BNIP3基因,同时设置阴性干扰对照组(Scramble siRNA),同前分组处理后再次检测细胞凋亡率、细胞活性及BNIP3、Bax、Bak蛋白的表达水平.结果:对5例标本获得的CESCs进行了干细胞标志物鉴定,其中细胞表面粘附分子44 (CD44)、CD73、CD90和CD105为阳性,CD34、CD45、CD11b、CD19和HLA-DR为阴性,提示CESCs具有干细胞特性.实验组细胞凋亡率为(29.12±0.65)％显著高于对照组的(14.87±2.03)％(P＜0.05);实验组的细胞增殖活性明显降低,为对照组的56.18％ (P＜0.05).与对照组相比,实验组BNIP3、Bax、Bak蛋白的表达均显著上调(P＜0.05).使用BNIP3 siRNA干扰后,缺氧和营养缺乏引起的细胞凋亡增加和细胞增殖活力下降均被明显抑制;同时,缺氧和营养缺乏导致CESCs中BNIP3、Bax和Bak的蛋白表达升高也被显著逆转(P＜0.05).结论:缺氧和营养缺乏能够诱导CESCs发生凋亡,此过程可能是通过上调BNIP3、Bax和Bak蛋白表达而发挥作用的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王建	第三军医大学附属新桥医院骨科	177	2858	27.0	47.0
2	刘杰	第三军医大学附属新桥医院骨科	26	209	8.0	13.0
3	袁超	第三军医大学附属新桥医院骨科	7	31	4.0	5.0
4	浦路桥	第三军医大学附属新桥医院骨科	1	3	1.0	1.0
5	贾敏	第三军医大学附属新桥医院骨科	3	9	2.0	3.0