PCR结合酶切-序列比对法鉴定B群脑膜炎奈瑟菌菌株

• 作者: 乔瑞洁 于旭博 冯宜扬 刘方蕾 吴兵 杨英英 罗树权 谢贵林 谭小梅 赵志强
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 关键词: B群脑膜炎奈瑟菌 菌种鉴定 唾液酸转移酶基因 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 字数: 2873字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2017.01.004

摘要

目的 用PCR结合酶切-序列比对法对B群脑膜炎奈瑟菌菌株进行鉴定.方法 用玻片凝集法对不同来源的15株B群脑膜炎奈瑟菌菌株进行初步检定,再用PCR结合酶切-序列比对法对上述15株菌株进行进一步鉴定,即用PCR结合酶切法扩增菌株的唾液酸转移酶siaD基因并对PCR产物进行酶切后,用BLAST软件将PCR产物测序结果与GeneBank 中原始siaD序列比对. 结果 15株菌株玻片凝集结果均为阳性;15株菌株的PCR产物片段大小均为460 bp;TaqⅠ酶切后,13株菌株的酶切产物片段大小仍为460 bp,其PCR产物测序比对结果与B群脑膜炎奈瑟菌原始siaD序列同源性均达到99%;其余2株酶切产物片段大小约200 bp,与C群脑膜炎奈瑟菌siaD原始基因序列同源性分别为98%和99%. 结论 15株菌株经PCR结合酶切-序列比对法鉴定,13株为B群脑膜炎奈瑟菌菌株,2株为C群脑膜炎奈瑟菌菌株;该方法可准确鉴定B群脑膜炎奈瑟菌菌株.