内质网应激和Ca2+超载在热打击诱导的肺微血管内皮细胞损伤中的作用与机制

• 作者: 余保军 古正涛 彭娜 童华生 苏磊
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 热打击 重症中暑 内质网应激
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 热打击细胞损伤机制专题研究
• 页码范围: 488-494
• 页数: 7页
• 分类号: R594.1+2
• 字数: 4762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-7402.2017.06.02

摘要

目的 研究内质网应激和Ca2+超载在热打击诱导的肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤中的作用及其可能的机制.方法 建立PMVECs温度梯度热打击模型.对照组细胞始终置于标准37℃、5%CO2细胞培养箱孵育,热打击组细胞分别置于39、41、43℃细胞培养箱中热打击2h,热打击后继续在37℃、5%CO2细胞培养箱孵育6h;另取细胞在43℃热打击前分别以20μmol/L钙离子抑制剂BAPTA-AM和50μmol/L环孢霉素A(CsA)预处理,后续处理同43℃热打击组细胞.Western blotting检测磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化的真核生物翻译起始因子2α(p-eIF2α)、活性转录因子4(ATF4)以及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达;流式检测细胞内Ca2+、线粒体膜电位以及线粒体通透性转换孔的变化;Caspase活性试剂盒检测caspase-3变化以反映细胞凋亡情况;Millicell-ERS细胞电阻仪测定细胞的跨上皮细胞电阻(TER)以了解细胞通透性的改变.结果 随着热打击温度的增高(41~43℃),PMVECs内p-PERK、p-eIF2α以及ATF4、GRP78蛋白表达增强,细胞内Ca2+水平增高,线粒体通透性转换孔开放,线粒体膜电位下降,细胞通透性增加,凋亡增多,且在43℃热打击组最为明显,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).使用Ca2+抑制剂预处理细胞可以促使PMVECs线粒体通透性转换孔、膜电位以及细胞通透性恢复,减少凋亡的发生;使用线粒体保护剂预处理细胞并不能减轻PMVECs的Ca2+释放,但可促进细胞通透性恢复以及减少凋亡发生.结论 热打击可激活PMVECs的内质网应激反应,并诱导细胞内Ca2+超载介导的细胞和线粒体损伤,这可能是中暑导致内皮细胞损伤的重要机制之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭娜	广州广州军区广州总医院重症医学科	5	36	3.0	5.0
2	苏磊	广州广州军区广州总医院重症医学科	9	119	4.0	9.0
3	童华生	广州广州军区广州总医院重症医学科	4	18	3.0	4.0
4	余保军	广东深圳南方医科大学附属深圳宝安医院重症医学科	1	4	1.0	1.0
5	古正涛	广东深圳南方医科大学第三附属医院重症医学科	1	4	1.0	1.0