荧光及磁示踪法观测脑组织液的引流分区特征

• 作者: 刘兰祥 张殊佳 李怀业 李昀倩 李玉亮 袁兰 赵越 韩鸿宾
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: 脑 分子探针技术 显微镜检查,共焦 磁共振成像
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 303-309
• 页数: 7页
• 分类号: R445.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-167X.2017.02.021

摘要

目的:对比光、磁两种探针示踪显示脑组织间隙(interstitial space,ISS)内分子扩散与团流运动的结果,研究脑组织液(interstitial fluid,ISF)在ISS内的分区引流特征.方法:36只 SD大鼠随机分为荧光检查组(18只)和磁示踪组(18只),每组再随机分为尾状核(caudate nucleus,Cn)、丘脑(thalamus,T)和黑质(substantia nigra,Sn)3个亚组,每亚组6只.荧光检查组:参考脑立体定位图谱,选取冠状位苍白球为中心层面,以Cn、T和Sn为靶点进行穿刺定位,分别导入2 μL 10 mmol/L荧光黄(lucifer yellow,LY)于相应脑区的中心位置,于Cn 3 h、T 2 h和Sn 1 h对大鼠用4％(体积分数)多聚甲醛进行心脏灌注固定后,将取出的鼠脑置于脑切片模具中,沿视交叉向后切片,以进针位点所在的冠状切片为中心层面,计为1片,前取3片,后取2片,每片厚约1 mm,共6片待检测,应用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)对离体切片进行采集,测量离体切片LY扩散的面积;磁示踪组大鼠也以Cn、T和Sn为靶点进行穿刺定位导入2 μL 10 mmol/L钆喷酸葡胺(gadolinium-diethylene triamine pentaacetic acidm,Gd-DTPA),应用磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)动态监测示踪剂在大鼠脑内的扩散,并利用Radiant软件测量Gd-DTPA的扩散面积.结果:LY与Gd-DTPA在Cn、T和Sn的ISS内扩散区域各不相同,Cn亚组LY与Gd-DTPA导入3 h后,比较1～6层LY与Gd-DTPA扩散面积为:(10.95±4.27) mm2 vs.(8.33±2.25) mm2、(18.16±4.74) mm2 vs.(16.42±2.88) mm2、(24.57±3.65) mm2 vs.(20.75±2.29) mm2、(34.81±3.32) mm2 vs.(28.88±1.51) mm2、(30.53±3.12) mm2 vs.(20.92±2.75) mm2、(12.15±4.92) mm2 vs.(10.00±1.89) mm2,对其在每层两组间扩散面积进行t检验,扩散面积差异均无统计学意义(t=0.940,P=0.400;t=0.546,P=0.614;t=1.534,P=0.200;t=2.809,P=0.480;t=2.693,P=0.055;t=0.707,P=0.518);T亚组中LY与Gd-DTPA导入2 h后,比较1～6层LY与Gd-DTPA扩散面积为:(5.56±4.61) mm2 vs.(3.33±2.25) mm2、(16.21±3.36) mm2 vs.(11.42±2.88) mm2、(19.00±5.21) mm2 vs.(15.75±2.29) mm2、(25.32±5.49) mm2 vs.(22.33±3.25) mm2、(17.34±5.31) mm2 vs.(15.92±2.75) mm2、(7.67±6.19) mm2 vs.(5.00±1.89) mm2,对其在每层两组间扩散面积进行t检验,差异均无统计学意义(t=0.753,P=0.493;t=1.875,P=0.134;t=0.990,P=0.378;t=0.810,P=0.464;t=0.413,P=0.701;t=0.716,P=0.514);Sn亚组LY与Gd-DTPA导入1 h后,比较1～6层LY与Gd-DTPA扩散面积为:(6.78±4.56) mm2 vs.(4.75±2.00) mm2、(12.65±5.04) mm2 vs.(10.44±1.13) mm2、(19.51±6.54) mm2 vs.(17.55±0.30) mm2、(28.72±5.45) mm2 vs.(24.48±1.32) mm2、(21.34±4.42) mm2 vs.(17.72±0.25) mm2、(13.00±5.46) mm2 vs.(12.00±2.88) mm2,对其在每层间扩散面积进行t检验,扩散面面积的差异均无统计学意义(t=0.705,P=0.519;t=0.743,P=0.499;t=0.517,P=0.656;t=1.310,P=0.260;t=1.416,P=0.292;t=0.281,P=0.793),但LY扩散面积略大于Gd-DTPA.结论:荧光法证实了磁示踪法发现的ISF在ISS内的分区引流特征,并且可为磁示踪法提供离体验证的技术与方法.荧光ISS成像法具有更高的对比度和分辨率,得到了更加精细的ISF引流分区区域.