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摘要:
旨在构建编码大鼠铁蛋白重链多肽1(ferritin heavy chain 1,Fth1)的慢病毒,并检测其在大鼠骨髓间充质干细胞(RMSC)中的表达.PCR扩增大鼠Fth1基因,克隆至pLenti-GFP-C慢病毒表达载体,包装慢病毒,感染RMSC细胞.荧光显微镜观察细胞内GFP荧光情况,Western blot检测Fth1的表达情况,WST-1试剂检测Fth1慢病毒感染组(RMSC-Fth1)和空载体组(RMSC-GFP)的细胞增殖活性.DNA测序结果表明,pLenti-GFP-C-Fth1慢病毒载体构建成功.包装慢病毒感染RMSC细胞后,荧光显微镜下可见明显绿色荧光,表明感染成功.Western blot结果显示,实验组细胞裂解液中可检测到特异的Fth1表达条带.细胞增殖实验显示,与空载体组相比,过表达Fth1并不影响RMSC细胞生长.成功构建并包装携带大鼠Fth1基因的慢病毒,其能够成功感染RMSC细胞并表达Fth1蛋白,且对细胞增殖无明显影响.
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文献信息
篇名 铁蛋白基因Fth1的克隆及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达
来源期刊 生物技术通报 学科
关键词 Fth1 磁共振报告基因 慢病毒载体 大鼠骨髓间充质干细胞
年,卷(期) 2017,(2) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 179-184
页数 6页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017.02.026
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李清海 浙江大学医学院附属第二医院放射科 6 23 3.0 4.0
2 刘伟 浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所 16 89 6.0 9.0
3 朱修良 浙江大学医学院附属第二医院放射科 5 1 1.0 1.0
传播情况
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2017(1)
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研究主题发展历程
节点文献
Fth1
磁共振报告基因
慢病毒载体
大鼠骨髓间充质干细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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生物技术通报
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大16开
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1985
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