60Co γ线照射血管内皮细胞外泌体中miRNA的鉴定分析

• 作者: 刘晓丹 周平坤 宋曼 王豫 莫丽君 高山山 黄巧华 黄波
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: γ射线 内皮,血管 外泌体 微小RNA 芯片分析技术 生物信息学
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 367-372
• 页数: 6页
• 分类号: R818.74
• 字数: 4632字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.05.009

摘要

目的 利用微小RNA(miRNA)芯片和生物信息学技术,研究受照射人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)产生的外泌体miRNA组分的变化,为揭示血管组织放射损伤及其旁效应机制提供新的线索.方法 超高速离心法收集对照组和4 Gy剂量照射组的HUVEC外泌体,运用电镜及Western印迹技术对外泌体进行鉴定,miRNA芯片技术分析细胞内和外泌体中miRNA表达谱,qRT-PCR法验证部分差异miRNA,通过miRDB和TargetScan预测差异miRNA的靶基因,DAVID、KEGG等在线工具进行生物信息学分析.结果 HUVEC经4 Gy照射后外泌体miRNA与对照组相比,照后0.5 h共鉴定到18个发生表达变化的miRNA分子,5个表达上调,13个表达下调;照后2 h鉴定出16个表达上调、5个表达下调miRNA分子;细胞内miRNA与对照组相比,照射后0.5、2 h分别有38个和85个差异表达miRNA,且差异有统计学意义(P<0.01).生物信息学结果表明,这些表达变化的miRNA可能通过参与调控MAPK、Ras、PI3K-Akt信号通路等途径影响细胞辐射旁效应.结论 电离辐射损伤导致血管内皮细胞外泌体miRNA分子组分和表达水平发生显著改变,这些miRNA的靶基因组产物在细胞放射损伤反应的信号通路调节中发挥重要作用.