华北大黑鳃金龟几丁质脱乙酰酶HoCDA5的分离及定位分析

• 作者: 张雅昆 王伟 赵丹 郜玉杰 郭巍
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 华北大黑鳃金龟 几丁质脱乙酰酶 HoCDA5 组织定位分析
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 页码范围: 93-99
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2017.0064

摘要

为了获得华北大黑鳃金龟(Holotrichia oblita)幼虫几丁质脱乙酰酶5(HoCDA5)及其在不同组织中的表达情况,本研究利用RACE-PCR方法扩增获得编码华北大黑鳃金龟几丁质脱乙酰酶的eDNA基因hocda5(GenBank登录号:ANI87833),该基因的开放阅读框为1140 bp,编码379个氨基酸,属于第V类CDA蛋白.在大肠杆菌BL21(DE3)细胞中成功表达约42 kDa的蛋白,制备了HoCDA5蛋白的多克隆抗体并对其进行效价测定.利用western blot方法分析了HoCDA5蛋白在不同组织,不同发育时期的表达情况.结果表明:该蛋白主要分布于围食膜,中肠,并且在中肠的前部含量最高,在幼虫的粪便中也检测到了较大量的HoCDA5蛋白,推测华北大黑鳃金龟幼虫的围食膜为Ⅰ型,HoCDA5可能随着围食膜的新陈代谢排出体外.本研究成功克隆和表达了HoCDA5重组蛋白,制备了多克隆抗体,对该蛋白进行了组织定位分析,为进一步明确HoCDA5蛋白的功能提供了理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王伟	河北农业大学生命科学学院	110	607	12.0	19.0
2	郭巍	河北农业大学生命科学学院	30	143	7.0	10.0
4	赵丹	河北农业大学生命科学学院	63	152	7.0	9.0
7	张雅昆	河北农业大学生命科学学院	6	20	2.0	4.0
8	郜玉杰	河北农业大学生命科学学院	2	15	1.0	2.0