多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色技术检测病毒性脑炎脑膜炎病原体

• 作者: 史智扬 吴涛 崔仑标 戚宇华 朱政 樊欢 葛以跃 赵康程
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 病毒性脑炎脑膜炎 多重PCR 核酸侵入反应 纳米金显色
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 991-995,1001
• 页数: 6页
• 分类号: R373.3
• 字数: 4181字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2017.11.008

摘要

目的 建立一种病毒性脑炎脑膜炎病原体多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色的检测方法.方法 针对几种重要的脑炎脑膜炎病毒(东方马脑炎病毒、西方马脑炎病毒、流行性乙型脑炎病毒、西尼罗病毒和尼帕病毒)保守区基因设计引物,进行多重PCR反应、核酸侵入反应及纳米金显色反应,对多种脑炎脑膜炎病毒同时进行检测,以森林脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒4种病原核酸评价其检测特异性,以体外转录的病毒RNA或扩增的PCR片段评价其检测敏感性,并对流行性乙型脑炎患者临床标本进行检测.结果 成功建立了一种脑炎脑膜炎病毒多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色的检测技术.建立的检测方法可特异的检测目的病原体,且与森林脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、基孔肯雅病毒和登革病毒无交叉反应.该方法对不同靶标的检测灵敏度均为103拷贝/μL,临床标本检测结果均为阳性.结论 建立的脑炎脑膜炎病毒多重PCR结合核酸侵入反应及纳米金显色技术的检测方法,具有较高的检测特异性及灵敏度,检测通量高,肉眼即可观察结果,在传染病病原体检测方面具有广阔的应用前景.