P53通过促进miR-145的表达抑制肺腺癌A549细胞的干细胞特性

• 作者: 夏凡 王仪民 王辉
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: P53 miR-145 干细胞多能性调节基因(OCT4) 非小细胞肺癌 肺腺癌A549细胞 干细胞特性
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 58-63
• 分类号: R730.54|R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2017.01.012

摘要

目的:探讨P53抑制肺腺癌A549细胞干细胞特性及其机制.方法:收集2014年3月至2015年12月解放军第85医院胸外科手术切除的30例非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)患者癌组织及癌旁组织,采用Real-time PCR检测NSCLC组织和癌旁组织中miR-145的表达.构建人P53基因的真核表达载体(peDNA3.1-P53)和突变载体[pcDNA3.1-P53R273H(CGT-CAT)],设计靶向P53基因的siRNA,分别转染A549细胞;细胞分为对照转染组(Vector或NC-siRNA)和实验组(Flag-P53或P53-siRNA);Western blotting检测P53蛋白过表达和干扰效率,Real-time PCR检测OCT4和miR-145的表达,荧光双报告基因和Western blotting技术检测证实A549细胞中干细胞多能性调节基因(OCT4)为miR-145的靶标分子.结果:NSCLC组织中miR-145的表达水平明显低于癌旁组织[(2.31 ±0.13)vs(3.51 ±0.27),P＜0.01];P53明显促进A549细胞中miR-145的表达[(1.84±0.14)vs(1.00 ±0.00),P＜0.01];miR-145 mimics显著抑制A549细胞中pGL3-OCT4-3’-UTR活性(P＜0.01)和OCT4蛋白表达水平(P＜0.05),而转染miR-145抑制剂可进一步增加OCT4表达水平,且逆转P53对A549细胞的干细胞特性的抑制作用.结论:P53通过促进miR-145表达下调OCT4表达,进而明显抑制A549细胞的干细胞特性,该结果为肺腺癌的临床诊断和治疗提供了新途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王辉	解放军第85医院肺科	104	487	11.0	17.0
2	夏凡	解放军第85医院肺科	7	68	4.0	7.0
3	王仪民	解放军第85医院肺科	4	7	2.0	2.0