环介导恒温扩增检测小肠结肠炎耶尔森菌

• 作者: 唐震 沈赟 秦思 郑东宇
• 来源期刊: 江苏预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 小肠结肠炎耶尔森氏菌 环介导恒温扩增技术 快速检测 检出限
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 病原检测专题论著
• 页码范围: 133-136
• 页数: 4页
• 分类号: R117
• 字数: 3589字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13668/j.issn.1006-9070.2017.02.04

摘要

目的 建立1种基于环介导恒温扩增(LAMP)的快速、敏感、特异检测小肠结肠炎耶尔森氏菌方法,为诊断该菌感染及食品中污染检测提供实验室诊断依据.方法 根据GenBank中foxA序列,设计多套引物,筛选最佳引物、优化反应条件,建立小肠结肠炎耶尔森氏菌DNA的LAMP检测方法,加入荧光染料钙黄绿素以肉眼判断结果.结果 根据扩增曲线,从4组引物中筛选出最优引物组进行LAMP检测,63℃恒温15 min开始出现扩增,最低检测限为1.46×10-7g/L,高于普通PCR最低检测限1个数量级;以金黄色葡萄球菌、沙门菌、假结核耶尔森氏菌等10株病原菌为模板进行LAMP检测,均未检出非特异性扩增反应.测序结果分析显示,LAMP扩增区不同菌株序列一致性约为95％,具有很好的保守性.结论 建立的方法能够满足基层实验室、应急检测等使用需求,有良好的应用价值,可在有条件的基层进行推广.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦思		16	61	5.0	7.0
2	沈赟		28	217	7.0	14.0
3	郑东宇		26	161	7.0	12.0
4	唐震		30	90	6.0	8.0