重寄生真菌盾壳霉pH信号通路中Pal相关基因的功能鉴定

• 作者: 吴明德 张静 方迪 李国庆 杨龙 楼轶
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 盾壳霉 核盘菌 pH信号通路 重寄生作用 草酸降解作用 抗真菌活性
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1069-1082
• 页数: 14页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20160443

摘要

[目的]研究pH信号通路(Pal)在重寄生真菌盾壳霉与寄主核盘菌互作过程中的作用.[方法]从盾壳霉全基因组信息中分析获得了6个Pal相关基因CmpalA、CmpalB、CmpalC、CmpalF、CmpalH和CmpalI的全编码序列和氨基酸序列,通过PEG介导的原生质转化技术获得了CmpalA、CmpalB、CmpalC、CmpalF和CmpalH等5个基因的敲除突变体,分析这些敲除突变体与野生型在菌落培养性状、重寄生能力、降解草酸能力、产生抗真菌物质能力等方面的差异.[结果]与野生型相比,在pH 6-8的条件下,5个Pal相关基因敲除突变体的菌丝生长受到显著抑制,这说明缺失Pal相关基因使盾壳霉对高pH值环境更加敏感.菌核重寄生试验发现5个Pal相关基因敲除突变体的重寄生能力均显著低于野生型.qRT-PCR试验结果表明,敲除Pal相关基因之后导致重寄生相关酶基因Cmch1、Cmg1和Cmsp1的表达量显著降低,而且pH信号通路下游的CmpacC基因的表达量也显著降低.Pal相关基因敲除突变体在pH 6条件下对草酸盐的降解能力显著高于野生型,同时这5个突变体在pH 8条件下产生抗真菌物质能力也显著高于野生型.[结论]pH信号通路相关基因的缺失影响盾壳霉对环境pH的响应.pH信号通路在盾壳霉与核盘菌互作中发挥重要作用,不仅影响盾壳霉的重寄生作用,而且还影响盾壳霉的草酸降解作用和抗真菌作用.