EC-SOD在同型半胱氨酸致单核细胞源性巨噬细胞氧化应激中的作用研究

• 作者: 刘现梅 和杨杨 孔繁琪 杨晓明 王楠 贾月霞 郭伟 金少举 马胜超
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞外超氧化物岐化酶 同型半胱氨酸 巨噬细胞 氧化应激
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 19-24
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨细胞外超氧化物岐化酶(EC-SOD)在同型半胱氨酸(Hcy)致巨噬细胞氧化应激中的作用及机制.方法 将THP-1单核细胞用佛波酯刺激48 h后演变成巨噬细胞,用0、50、100、200、500μmol/L Hcy作用细胞72 h,并加设叶酸+维生素B12(VitB12)干预组(100 μmol/L Hcy+30 μ mol/L叶酸+30 μmol/L VitB12).微板法检测氧化应激指标(H2O2、O2-、OH-)的变化;实时荧光定量PCR检测巨噬细胞中EC-SOD的mRNA表达水平;Western blot检测巨噬细胞中EC-SOD的蛋白表达水平;EC-SOD测定试剂盒检测EC-SOD活性.分别构建EC-SOD重组质粒和干扰质粒转染细胞,检测EC-SOD的mRNA及蛋白的表达水平以及超氧阴离子的表达.结果 与对照组相比,100、200、500 μmol/L Hcy组H2O2、OH-活性显著增高(P＜0.01),EC-SOD mRNA和蛋白表达明显降低(P＜0.01).与对照组相比,100、200、500μmol/L Hcy组EC-SOD活性分别下降了13.92％、8.62％、10.32％ (P＜0.05,P＜0.01).与100 μmol/L Hcy组相比,叶酸+VitB12干预组EC-SOD mRNA的表达升高了47％.分别转染EC-SOD重组质粒和干扰质粒后,与100μmol/L Hcy组相比,EC-SOD重组组O2-含量降低了63.89％,干扰片段-596组O2-含量则增加了33.59％(P＜0.05,P＜0.01).结论 EC-SOD参与了Hcy导致的单核细胞源性巨噬细胞的氧化应激.在抑制Hcy诱导动脉粥样硬化的过程中,EC-SOD可能发挥着重要的作用.