磁珠法自动化纯化现场检材DNA方法研究

• 作者: 伊海 张浩 张玉红 李文江 杨敏 杨耕野 秦海燕 贾东涛 韩海军
• 来源期刊: 中国法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医物证学 自动化批量纯化DNA 磁珠法 TE-MAGS
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: DF795.2
• 字数: 1999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13618/j.issn.1001-5728.2017.01.003

摘要

目的 利用TE-MAGS在TECAN工作站上结合磁珠试剂盒,建立自动化工作站批量纯化现场检材DNA的方法,并探讨其在法医物证检案中的应用.方法 灵敏度测试:标准品使用0.1ng/μL 9947A,用200μL TES稀释制备DNA总量0.1ng~1ng共10种的标准样品,采用本文方法提取纯化,使用IdentifilerTM试剂盒扩增,用3130XL型测序仪检测,GeneMapper ID-X分析,分析STR图谱质量;纯化能力测试:在1ng总量的标准样品中加入腐殖酸、血红素,采用本文方法提取纯化、扩增检测,分析STR图谱质量;实际案件应用对比:收集304份现场检材,分别采用本方法和硅珠法进行提取纯化,经扩增检测,统计对比两种提取纯化方法STR分型成功率.结果 灵敏度测试:0.1ng~0.2ng总量标准样品提取的DNA模板,扩增后可检测到部分基因座STR图谱,0.3ng~1ng总量标准样品提取的DNA模板,扩增后可以得到完整的STR图谱;纯化能力测试:对混合有一定浓度的腐殖酸、血红素的标准样品的提取产物检测图谱未见明显抑制;实际案件应用对比测试:304份现场检材工作站磁珠法检出成功率(50%)高于硅珠法(40.8%).结论 本文所建立的方法缓冲范围较大,回收率高,纯化能力强,提取产物STR分型成功率高,适合现场检材批量化DNA检验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩海军		15	68	4.0	8.0
2	贾东涛		15	79	5.0	8.0
3	张玉红		14	72	4.0	8.0
4	杨耕野		4	9	2.0	3.0
5	伊海		8	15	3.0	3.0
6	李文江		2	5	1.0	2.0
7	杨敏		7	15	3.0	3.0
8	秦海燕		6	7	1.0	2.0
9	张浩		6	7	1.0	2.0