NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的重组表达及甘露醇的转化条件

• 作者: 刘业学 封志媚 李玉 赵雅童 路福平
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 甘露醇脱氢酶 NADPH 甘露醇 大肠杆菌 纯化
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 186-191
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0168

摘要

对NADPH依赖的甘露醇脱氢酶的异源表达和对果糖的转化情况进行分析,为在细胞内构建甘露醇的合成途径奠定基础.构建重组菌株BL21(DE3)/pET28a-mdh,对其进行诱导发酵后,通过His标签对目的蛋白进行纯化,并利用HPLC分析纯化后的甘露醇脱氢酶转化果糖生成甘露醇的情况.成功构建了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶重组表达菌株BL21(DE3)/pET28a-mdh,并对表达后的甘露醇脱氢酶进行了纯化,测得纯化后的甘露醇脱氢酶酶活力为270 U/mL.对酶法转化果糖得到甘露醇的转化条件进行优化,确定最佳的转化条件为:当底物浓度为300 g/L,反应初始pH5.8,温度40℃,NADPH终浓度为9 mmol/L时,甘露醇转化率可以达到97.4%.实现了NADPH依赖的甘露醇脱氢酶在大肠杆菌中的活性表达,为进一步研究大肠杆菌合成甘露醇的代谢调控提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	路福平	天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室	184	1421	20.0	27.0
2	李玉	天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室	37	148	6.0	10.0
3	封志媚	天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室	2	3	1.0	1.0
4	刘业学	天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室	2	1	1.0	1.0
5	赵雅童	天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室	1	1	1.0	1.0