SKP2突变载体S72A和S72D的构建以及生物学功能研究

• 作者: 史海龙 曲璇 李军 韩洛川 马晓军
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: S期激酶相关蛋白 突变载体 过表达载体
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 813-816
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 2629字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2017.08.012

摘要

目的 构建SKP2突变载体SKP2S72A和SKP2S72D并验证其生物学功能.方法 利用一步法PCR合成含有SKP2S72A和SKP2S72D突变序列,通过酶切连接将序列插入pBabe载体中,将克隆载体转入大肠杆菌后,筛选阳性克隆进行序列测定,将鉴定正确的克隆转染HEK293细胞,并利用Western blot实验鉴定基因表达及其对靶蛋白P27的影响.结果 PCR扩增得到序列测定结果与预期序列完全一致;构建的SKP2S72A和SKP2S72D突变质粒,用于基因转染纯度较好,在真核细胞中成功表达,并且影响了P27的蛋白水平.结论 构建获得SKP2突变载体,为今后SKP2泛素连接酶活性的功能研究提供良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李军	陕西中医药大学基础医学院生物学教研室	119	494	12.0	17.0
2	韩洛川	陕西中医药大学基础医学院生物学教研室	42	40	3.0	5.0
3	史海龙	陕西中医药大学基础医学院生物学教研室	46	57	5.0	7.0
4	马晓军	陕西中医药大学基础医学院生物学教研室	46	243	8.0	14.0
5	曲璇	陕西中医药大学基础医学院生物学教研室	13	12	2.0	3.0