高产靛蓝色素大肠杆菌工程菌构建及其发酵转化条件

• 作者: 孙宝国 岳建明 杜灵燕 王子豪 王成涛 赵吉兴 隆歆然 马金旺
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 靛蓝色素 苯乙烯单加氧酶 色氨酸 基因工程菌株 发酵
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 加工技术
• 页码范围: 64-72
• 页数: 9页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2017.03.007

摘要

天然食用蓝色系色素是一类稀缺资源.本文克隆假单胞菌B3中苯乙烯单加氧酶基因styAB,将其超量表达于大肠杆菌DH5α,构建高产靛蓝色素工程菌,研究色氨酸发酵转化生成靛蓝色素的影响因素,通过正交设计试验优化靛蓝色素发酵条件.结果表明,构建的styAB基因过表达大肠杆菌DH5α-styAB具有较高靛蓝色素合成能力,而野生菌DH5α中未检测到靛蓝色素生成;发酵液起始pH、温度、时间、底物色氨酸浓度等因素条件对DH5α-styAB靛蓝色素合成代谢有一定影响.正交设计试验优化的发酵条件为:起始pH 6.8、色氨酸质量浓度1.2 mg/mL、发酵温度33℃、发酵时间28 h.在此条件下,靛蓝色素产量达到592.50 mg/L,较未优化前(414.61mg/L)提高了42.9％,接近理论值770.60 mg/L;工程菌DH5α-styAB发酵底物吲哚的靛蓝色素产量为60.00 mg/L,表明色氨酸更适宜为靛蓝色素发酵底物.上述结果为天然靛蓝色素生物转化提供了理论依据和技术指导.