乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白HBSP与TGFβ1诱导蛋白1相互作用促进TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化

• 作者: 林旭 梁菲菲 轩丹丹 闫小利 陈婉南 黄俊高
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 RNA剪接 转化生长因子β1诱导蛋白1 上皮间质转化 侵袭
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 305-311
• 页数: 7页
• 分类号: R373
• 字数: 4864字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2017.04.003

摘要

目的 探讨乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白(Hepatitis B spliced protein,HBSP)与转化生长因子1诱导蛋白1(transforming growth factor-β1-induced transcript 1,TGFβ1I1)相互作用对TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响.方法 构建HBSP慢病毒表达载体,利用293T细胞包装慢病毒颗粒,感染Huh7肝癌细胞株.以5 ng/mLTGFβ1分别诱导稳定表达HBSP的慢病毒细胞株及其对照细胞株,观察细胞形态的变化,并提取细胞蛋白,Westernblot检测上皮间质转化标志物E-钙黏素(E-cadherin,E-cad)、紧密连接蛋白(Claudin-1)、β-链蛋白(β-catenin)、N-钙黏素(N-cadherin,N-cad)的变化.进而以TGFβ1I1特异性siRNA转染上述细胞,Westernblot观察以上指标变化情况.最后以侵袭小室实验和划痕实验分别检测TGFβ1诱导的细胞侵袭与迁移能力的变化.结果 筛选获得稳定表达HBSP的慢病毒细胞株Huh7-HBSP-flag-HIV及其对照细胞株Huh7-flag-HIV.以TGFβ1诱导后在显微镜下观察到细胞形态由紧密的上皮形态变为松散的间质形态;特异性抗体检测表明上皮标志物E-cad、Claudin-1、β-catenin表达量下降,而间质标志物N-cad表达上升.侵袭小室实验和划痕实验表明TGFβ1诱导的HBSP表达株侵袭及迁移能力增强.而转染TGFβ1I1特异性siRNA可逆转以上现象.结论 HBSP与TGFβ1I1相互作用可促进TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化并增强其侵袭迁移能力,提示HBSP在HBV相关性肝细胞肝癌发生发展中具有重要的致病意义.