铜绿假单胞菌凝集素PA-ⅠL的纯化表达及活性评价

• 作者: 姜永强 孔德聪 徐茂凯 郑玉玲 郝淮杰
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 铜绿假单胞菌 PA-ⅠL蛋白 糖鞘脂
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 205-208,245
• 页数: 5页
• 分类号: Q936
• 字数: 3858字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.03.010

摘要

目的 构建铜绿假单胞菌凝集素PA-ⅠL基因的重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达并评价其生物学活性.方法 以铜绿假单胞菌PAO1基因组为模板设计引物,构建pET-28a (+)-PA-ⅠL重组表达质粒,转化至大肠杆菌中诱导表达,用Ni 亲和层析法对目的蛋白进行纯化.流式细胞术评价重组表达的PA-ⅠL蛋白对细胞表面Gb3/CD77的结合活性,菌落平板计数法评价重组蛋白在细菌黏附宿主细胞过程中的功能.结果与结论 SDS-PAGE电泳显示,纯化后的PA-ⅠL蛋白具有较高的纯度,重组表达的PA-ⅠL蛋白能与细胞表面的糖鞘脂Gb3/CD77结合,且呈浓度依赖性抑制PA的PAO1对宿主细胞的黏附.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑玉玲	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	33	110	6.0	9.0
2	姜永强	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	44	201	7.0	11.0
3	徐茂凯	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
4	孔德聪	军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	郝淮杰	中国科学院微生物研究所病原微生物与免疫学重点实验室	2	3	1.0	1.0