氯化铯密度梯度离心法提纯枣疯病植原体DNA

• 作者: 刘玲雪 杨淑珂 肖琦 路兴波 高瑞
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 枣疯病 植原体 CTAB法 氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 加工贮藏·分析检测
• 页码范围: 134-137
• 页数: 4页
• 分类号: S763.1|S665.1
• 字数: 2962字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2017.11.027

摘要

本研究利用CTAB法提取感染枣疯病的枣树叶片总DNA,再通过氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心从总DNA中富集纯化枣疯病植原体DNA.利用枣树26S rDNA基因和枣疯病植原体16S rDNA基因的特异引物,分别对富集纯化前后感病枣树叶片总DNA进行PCR扩增.结果表明,模板浓度为1 ng/μL时,富集后的总DNA模板扩增枣树26S rDNA的电泳条带亮度低于富集前,扩增枣疯病植原体16S rDNA电泳条带亮度明显高于富集前.Real-time PCR检测结果表明,模板浓度为1 ng/μL时,纯化后的枣疯病植原体DNA中26S rDNA相对纯化前的量为0.0638,而JWB相对纯化前的量为0.5035,这说明采用氯化铯-双苯酰亚胺密度梯度离心法可以有效地从感染枣疯病枣树总DNA中富集纯化枣疯病植原体DNA.