枣实蝇气味结合蛋白基因的克隆及表达谱分析

• 作者: 于艳雪 张伟 张俊华 张小菊 张祥林 李亚伟 杨定 王科珂 陈乃中
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 枣实蝇 气味结合蛋白 组织表达
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 页码范围: 313-319
• 页数: 7页
• 分类号: S436.65|S188
• 字数: 4392字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2017.02.014

摘要

[目的]克隆枣实蝇Carpomya vesuviana Costa气味结合蛋白(odorant binding protein,CvcoOBP)基因,对其表达谱进行分析,为枣实蝇气味结合蛋白的深入研究奠定基础.[方法]对枣实蝇头部RNA进行转录组测序,通过蛋白序列比对以及构建系统进化树分析枣实蝇OBP序列,运用半定量反转录-聚合酶链反应(semi-quantitative reverse transcription and polymerase chain reaction,sqRT-PCR)方法对获得的CvcoOBP序列进行组织表达特异性研究.[结果]转录组测序后共获得7个OBP,命名为(GenBank登录号分别为:KU975053、KU975054、KU975055、KX059394、KU975056、KX059395、KX059396).对CvcoOBP1-7进行蛋白序列比对发现,CvcoOBP1、CvcoOBP3、CvcoOBP4、CvcoOBP6、CvcoOBP7是典型的OBP家族成员,具有6个高度保守的半胱氨酸残基;CvcoOBP2和CvcoOBP5属于"Minus-C"家族成员,具有4个高度保守的半胱氨酸残基.系统进化分析结果显示,CvcoOBP1-7分别与不同的OBP有较近的进化关系.半定量PCR检测结果发现,CvcoOBP1-7在枣实蝇腹部、头部及胸部都有表达,且表达量较高;CvcoOBP1、CvcoOBP2在翅中有表达,但表达量相对较低;CvcoOBP1、CvcoOBP5、CvcoOBP6在足中也有表达,但表达量相对较低.[结论]获得并分析了7个CvcoOBP,不同CvcoOBP表达部位和表达量各不相同;CvcoOBP1-6分别属于OBP56g,OBP8a,OBP83a,OBP56h,OBP99c,OBP83ef类型.