半乳糖凝集素3对内皮细胞生长、迁移及炎症反应的影响

• 作者: 仲琳 朱玉洁 杨军 林泽润 梁平平 王佳慧 龚磊
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 半乳糖凝集素3 内皮细胞 细胞迁移 炎症
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1065-1072
• 页数: 8页
• 分类号: R363
• 字数: 4941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.06.018

摘要

目的:探讨半乳糖凝集素3(GAL-3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)生长、迁移及炎症反应的影响及其作用机制.方法:体外培养HUVECs,给予GAL-3重组蛋白2 mg/L或GAL-3短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体处理,实验分为正常对照组、GAL-3重组蛋白处理组、阴性对照组和GAL-3-shRNA组.通过实时荧光定量PCR检测GAL-3、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、IL-6、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和cyclin D1的mRNA水平;利用Western blot 检测 GAL-3、MCP-1和IL-6的蛋白表达;利用ELISA检测MCP-1和IL-6在培养基中的水平;通过CCK-8实验和划痕实验检测HUVECs的活力和迁移能力;利用Western blot检测信号分子热休克蛋白90(HSP90)、ERK1/2、p-ERK1/2、JNK和p-JNK的蛋白水平.结果:首先,给予GAL-3重组蛋白处理后,GAL-3、MCP-1和IL-6的mRNA及蛋白水平,MMP-9和cyclin D1的mRNA水平,MCP-1和IL-6在培养基的分泌水平均明显高于正常对照组;而GAL-3-shRNA感染细胞后,上述分子的表达水平均低于正常对照组和阴性对照组.其次,GAL-3重组蛋白处理后,细胞活力和迁移能力明显高于正常对照组;而GAL-3-shRNA感染后,细胞活力和迁移能力均低于正常对照组和阴性对照组.此外,GAL-3重组蛋白处理组中,p-ERK1/2和HSP90 的蛋白水平高于正常对照组;而GAL-3-shRNA 组中,p-ERK1/2和HSP90 的蛋白水平均低于正常对照组和阴性对照组.p-JNK的蛋白水平在各组间比较,差异无统计学显著性.结论:GAL-3促进血管内皮细胞的生长、迁移及炎症反应的发生,其机制可能与HSP90-ERK1/2信号通路有关.